产品货号：
BTN71001
中文名称：
柱式病毒RNA提取试剂盒
英文名称：
Virus RNA column extraction kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是专门用于从血清(血浆或脑脊液)、病毒拭子保存液、培养基等液体样品中提取微量病毒RNA的试剂盒。
保存：RT，其中病毒裂解液需置于4℃保存，有效期1年。
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- 操作简单快捷，整个过程只需要30分钟左右。
- 灵敏度高，通过RT-PCR检测到的灵敏度最高可以达到50拷贝/mL（根PCR条件相关）。
- 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
- 一般一次可以处理0.2mL样品。如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL样品。
- 得到的RNA可以用于后续的RT-PCR和荧光定量RT-PCR。
- 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
- 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
- 本制品只能用于科研。
| 组分 | 规格 |
| 病毒裂解液 | 30mL |
| 核酸挂柱液 | 40mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| RNA洗脱液 | 10mL |
保存：RT，其中病毒裂解液需置于4℃保存，有效期1年。
- 如果有N个样品，标记N+2个1.5～2mL螺旋盖塑料离心管，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在做标记时，最好标出向心面或离心面，以便在后续离心后取上清时不会把沉淀丢失。
- 各加入0.2mL液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等）。
- 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入0.2mL自备生理盐水中挤压出液体，然后取0.2mL进行提取。
- 如果是粪便等半固定样品，则取约0.3mL的样品，加入0.3mL自备生理盐水，震荡重悬，离心取0.2mL上清进行提取。
- 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的RNA中有细胞的基因组DNA污染。血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。血浆最好按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
- 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用0.2mL上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下最后得到的RNA不可避免的会含有基因组DNA污染。
- 如果是病毒样品保存液或病毒采样管，则直接取用0.2mL保存液。
- 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用1.5mL上述方法得到的液体在4℃ 24000g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL、用剩下的0.2mL继续操作。
- 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入0.2mL自备生理盐水中挤压出液体，然后取0.2mL进行提取。
- 加入0.6mL病毒裂解液，振荡30秒混匀。
- 病毒裂解液在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
- 室温放置10分钟。
- 加入0.8mL上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8mL）到离心吸附柱中。
- 室温放置2分钟后12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
- 将剩余的另外一半裂解液（0.8mL）转移到离心吸附柱中。
- 室温放置2分钟后12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
- 加入0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
- 加入0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此步为第二次洗涤，可以跳过。
- 12000g室温离心半分钟，去掉离心吸附柱中残留的液体。
- 在离心吸附柱的滤膜的中部加入30～50μL RNA洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中.
- 室温放置2分钟后12000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为RNA。
- RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。
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