产品货号:
BTN180807
中文名称:
外泌体DNA/RNA提取试剂盒
英文名称:
Exosome DNA/RNA Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是用于外泌体核酸(DNA和RNA)纯化试剂盒。
保存:RT,有效期一年,外泌体核酸提取溶液A长期保存需要置于4℃。
一、备外泌体
本试剂盒不提供外泌体提取的相关试剂,自备的外泌体需要立即使用或放-80℃长期保存。用于核酸提取的外泌体可以是沉淀,也可以是重悬液。
二、外泌体核酸提取
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外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(40~100nm)。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。
- 一管式操作,在同一试管中完成,减少样品丢失。
- 沉淀法,不使用离心柱,能有效避免小RNA的丢失。
- 能同时提取RNA(包括RNA和miRNA)和DNA。
- 回收率达到90%以上,高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
- 无毒环保,不需要使用苯酚和氯仿等有毒的有机溶液。
- 本制品只能用于科研,不能用于临床。
组分 | 规格 |
外泌体核酸提取溶液A | 30mL |
外泌体核酸提取溶液B | 35mL |
外泌体核酸提取溶液C | 50mL |
RNase-free水 | 1mL |
保存:RT,有效期一年,外泌体核酸提取溶液A长期保存需要置于4℃。
一、备外泌体
本试剂盒不提供外泌体提取的相关试剂,自备的外泌体需要立即使用或放-80℃长期保存。用于核酸提取的外泌体可以是沉淀,也可以是重悬液。
二、外泌体核酸提取
- 从冰箱取出外泌体核酸提取溶液A放室温或握在手上融化,直到没有任何晶体。
- 标记1.5~2mL螺旋盖塑料离心管,为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。最好在每个管盖上做个标记,以在下步离心时有意将标记方向朝向心面或离心面。
- 将不超过200μL的外泌体重悬液加入到标记好的塑料离心管中。
- 每管中加入600μL外泌体核酸提取溶液A,盖上盖子后振荡数秒混匀。
- 室温放置3分钟。
- 加入0.7mL外泌体核酸提取溶液B,旋紧盖后振荡30秒混匀。
- 14000g室温离心至少15分钟。注意:离心时如果把标记固定朝向心面或离心面,则在后面的操作均得按此朝向进行离心。
- 小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的核酸沉淀(此时可能看不见)。
- 加入1.0mL外泌体核酸提取溶液C,振荡数秒.
- 14000g室温离心5分钟。注意:离心管标记的朝向要跟上面的一致。
- 小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的核酸沉淀(可能在离心管内壁的离心面呈膜状)。
- 再短暂离心数秒,用移液器移弃残留液体(约50μL)。
- 加入200μL RNase-free水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状沉淀。如果溶液稍呈混浊状属于正常。
- 所得溶液即为外泌体核酸溶液。如果只需要RNA,必须去除DNA,则另外用自备的RNase-free DNase对DNA污染进行降解。反之如果只需要DNA,必须去除RNA,则另外用自备的DNase-free RNase对RNA污染进行降解。
- 直接取适量用于后续实验。样品可以室温放置2小时,也可保存于-80℃保存一个月。
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