产品货号:
ALH432
中文名称:
DNA消化试剂盒
英文名称:
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,本试剂盒可直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本制品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。
- 简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
- 确保RNase-free,可以保证RNA分子完整性。
- 兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
组分 | 规格 |
DNase Buffer | 1.25mL×2 |
RNase-free DNase I | 0.25mL |
去蛋白液RW1 | 40mL |
保存:RNase-free DNase及DNase Buffer置于-20℃保存,避免反复冻融,去蛋白液RW14℃保存。
DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套专门用于柱上消化,一般的10×DNase buffer并不能用于膜上的DNase消化,不能替代。
- 按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
- 取45μL DNase I buffer和5μL RNase-free DNase I离心管轻轻吹打混匀成工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。
注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90μL DNase I buffer和10μL RNase-free DNase I)。 - 向吸附柱RA中加入350μL去蛋白液RW1,12000rpm离心30秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
- 向吸附柱RA中央加入50μL的DNase I工作液,室温(20~30℃)放置15分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。
- 向吸附柱RA中加入350μL去蛋白液RW1,12000rpm离心30~60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
- 接漂洗液RW步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。
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