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凝血酶(牛血浆)图片
产品货号:
LA13468
中文名称:
凝血酶(牛血浆)
英文名称:
Thrombin from bovine plasma
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37KD,是由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。




  • 纯度高:SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带;
  • 比活高:比活力不低于2000单位/mgpr;可以PK最好的进口产品,目前没有检索到更高比活的国产同类产品;
  • 不含有其他蛋白酶活性;
  • 灭活病毒:生产过程中采用S/D法和干热法两步灭活病毒;
  • 性价比及其突出,尤其对于工业客户,国内产品的价格,国际顶尖产品质量。



CAS号9002-04-4
分子量37kD
外观白色冻干粉或块状物
溶解性生理盐水
纯度SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带
比活度不得低于2000单位/mgpr
储存条件2~8℃,避光防潮密闭干燥



储备溶液可在生理盐水中以100单位/ml的浓度制备。由于凝血酶溶液吸附到玻璃上,因此建议将溶液等份放入塑料管中,并在-20℃下储存。


一、融合蛋白切割
由于凝血酶具有切割序列专一性强,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶,能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之间切割0.3到16小时。凝血酶最佳的切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸,一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是X2-R[K]-X1',这里X2或者X1'是甘氨酸,例如A-R-G和G-K-A,这里切割发生在第二个残基后。在凝血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切,通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割,而且也可以避免可能发生的错误切割。有效的消化缓冲液是20mM Tris-HCl缓冲液,含150mM氯化钠,pH8.0。凝血酶可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。

二、血小板聚集试验
凝血酶与血小板表面的凝血酶受体结合,活化血小板,使血小板粘附和聚集。
血小板聚集实验参照文献:兔血用塑料管收集和用ACD(86mmol/L柠檬酸钠,111mmol/L葡萄糖,53mmol/L柠檬酸)0.15体积比抗凝,200g离心10min,离心2次,取上清,800g离心15min。沉淀中加Tyrode—Hepes缓冲液(140mmol/L NaCl,5mmol/L KCl,1mmol/L MgCl2,10mmol/L Hepes,10mmol/L葡萄糖,pH7.4)调节至血小板数为(3~4)×1011/L。血小板聚集用血液凝集仪来测定。血小板悬液(0.2mL)与药物温育1min,然后用凝血酶(500 u/L)作用5min,记录聚集情况。
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