BalbDesalt G-25 Multi Spin样品离心脱盐柱(>5kDa,130μL,96孔)一种简单、快速、96孔高通量地使用Balbdex G-25 Medium (G-25M)基质分离大分子量物质与小分子量物质的预包装即用型层析柱,俗称脱盐柱,主要用于去除蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。本脱盐柱使用的填料为Balbdex G-25 Medium,填料粒径为70~250μm,可分离分子量>5kDa的蛋白质或其它大分子样品,柱床体积为500μL,建议上样量为70~130μL,本制品的功能和使用方法与Cytiva的PD Multi Trap G-25基本一致,适用于离心法。

组分 | 1块 | 5块 |
样品离心脱盐柱(>5kDa,130μL,96孔) | 1块 | 5块 |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期1年。

基质 | Balbdex G-25 Medium |
填料粒径 | 70~250μm |
分离范围 | >5kDa |
建议上样量 | 70~130μL |
样品稀释倍数 | 1 |
柱床体积 | 500μL |
化学稳定性 | 所有常用的缓冲剂;避免使用氧化剂 |
pH稳定性 | pH2~13 |
使用方法 | 离心法 |
保存条件 | 20% ethanol,4~30℃ |

BalbDesalt G-25 Multi Spin样品离心脱盐柱(>5kDa,130μL,96孔)采用的是Balbdex G-25 Medium基质,该基质是葡聚糖(Dextran)经环氧氯丙烷交联剂通过醚键交联形成的三维网状筛孔结构的高分子聚合物,与Sephadex G-25 Medium的性能基本一致。本制品用于分离样品时,体积较大的大分子不能进入基质网状筛孔而被阻隔在基质凝胶之外,随着流动溶液沿着基质凝胶颗粒间的缝隙移动,下移速度较快,先被洗脱出柱;体积较小的分子或离子可以进入基质网状筛孔从而进入凝胶内部,随着流动溶液在凝胶颗粒的网孔内移动,因此体积较小的分子或离子在基质内停留时间更长,下移速度较慢,后被洗脱出柱,这种分离纯化方式被称为尺寸排阻层析(SEC),也常被叫做分子筛层析(MSC)或凝胶过滤层析(GFC)。

图1.百奥莱博BalbDesalt脱盐柱的工作原理图。

BalbDesalt G-25 Multi Spin样品离心脱盐柱(>5kDa,130μL,96孔)应用广泛,可以有效去除样品中的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。
- 可用于对蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品进行脱盐,完成溶液置换;
- 去除培养基中的酚红,便于后续通过离子交换层析纯化蛋白质或核酸;
- 去除DNA样本中的单核苷酸,便于后续DNA测序;
- 去除样本中的小分子量标记物;
- 通过分离大分子量物质与小分子量物质终止两者之间的反应;
- 移除蛋白酶的产物、辅助因子或抑制剂;
- 去除核酸标记反应中多余的放射性标记物;
- 去除体外生物素标记反应中多余的生物素(D-Biotin)。

BalbDesalt G-25 Multi Spin样品离心脱盐柱(>5kDa,130μL,96孔)显著优于传统半透膜透析方法。
- 分离速度快、节省时间:脱盐柱可以对样品进行快速分离,处理一个样品通常只需要5分钟,而半透膜透析至少需要6小时;
- 适合小体积操作、样品回收率高:脱盐柱可以有效处理70~130μL的小体积样品,回收率通常>90%,但是半透膜透析后释放样品时会有部分样品粘附在半透膜上,无法完全回收,因此不适合小体积样品;
- 节省溶液:半透膜透析时需要大量的缓冲液,但是本脱盐柱仅需2mL缓冲液即可完成实验。

- 本Multi Spin脱盐柱不包含96孔废液板和96孔收集板。96孔废液板推荐我司的96孔U形底深孔板(YTC4801/YTC4802)或其它类似的96孔深孔板进行废液的收集,96孔收集板推荐我司的96孔板(YTC4803/YTC4804/YTC4805)或其它类似的96孔板进行样品的收集。
- 为防止交叉污染,本制品建议一次性使用。
- 脱盐柱反复使用,可能会导致样品回收率降低。
- 请勿冷冻保存本制品,冻结会导致脱盐柱的基质碎裂。
- 保存和纯化过程中应始终保持基质湿润,避免气泡进入脱盐柱中。
- 建议在缓冲液中加入25mM NaCl,以防止潜在的离子间相互作用。如不能使用NaCl,可以尝试加入100mM乙酸铵(NH4Ac)或100mM碳酸氢铵(NH4HCO3)挥发性缓冲液。
- 当缓冲液中盐浓度>1M时,疏水性物质在柱子内的停留时间可能会延长或与基质结合。
- 当缓冲液中含有>1.5M (NH4)2SO4时,脱盐柱基质可能会发生收缩。

- 样品的准备:样品上样前需通过离心或0.45μm滤膜去除不溶物。
- 在常规缓冲液中,高至70mg/mL的蛋白样品或5mg/mL的葡聚糖高分子聚合物,不会影响分离效果。
- 在样品粘度不高的情况下,样品浓度不会影响分离效果,样品浓度越高则回收率越高,低浓度样品回收率可能会降低。
- 样品回收率与样品种类直接相关,通常情况下70%~90%的样品回收率属于正常现象。
- 平衡使用的缓冲液即为样品存储缓冲液。
- 脱盐柱的预平衡:
- 轻轻上下颠倒96孔板脱盐柱,并轻轻左右晃动,以使脱盐柱中的树脂分布更均匀,然后撕去上封板膜,将96孔板脱盐柱置于96孔废液板上,800×g离心1分钟,丢弃脱盐柱离心下来的保存溶液,并重新把脱盐柱置于96孔废液板上。96孔废液板推荐使用我司的96孔U形底深孔板。
- 使用非水平转头的情况下,由于离心会使树脂压实形成一个向上的斜面,该斜面的方向宜在后续步骤中保持,所以在96孔板脱盐柱外壳上做好标记,在随后的离心步骤中需要保持这个方向,确保离心后斜面的方向和位置不会改变。
- 向96孔板脱盐柱树脂顶部加入400μL缓冲液,800×g离心1分钟,丢弃溶液,重复此步骤4次(共5次)。
- 轻轻上下颠倒96孔板脱盐柱,并轻轻左右晃动,以使脱盐柱中的树脂分布更均匀,然后撕去上封板膜,将96孔板脱盐柱置于96孔废液板上,800×g离心1分钟,丢弃脱盐柱离心下来的保存溶液,并重新把脱盐柱置于96孔废液板上。96孔废液板推荐使用我司的96孔U形底深孔板。
- 上样:用移液器贴近树脂的中心位置缓慢加入70~130μL样品(不要触碰、吹散树脂),使树脂吸入样品。
- 样品注入方式会直接影响样品回收率,需要将移液器吸头伸入脱盐柱空管中,在贴近树脂的中心位置缓慢加入样品。
- 样品体积不要超过脱盐柱规定的样品量体积,否则会降低样品回收率,并且也会导致脱盐不充分。
- 洗脱:将96孔板脱盐柱至于96孔收集板上,800×g离心2分钟,此时的流穿液含有需要收集的样品。96孔收集板推荐我司的96孔板。
- 检测:可通过的A280nm紫外吸收值(如NanoDrop)、蛋白浓度测定试剂盒(Bradford法)、SDS-PAGE凝胶电泳配合考马斯亮蓝超快染色液等方法检测样品所在的收集管。

附1:我公司提供多种类型的脱盐柱,不同类型脱盐柱的比较和选择请参见下表:
产品名称 | BalbDesalt脱盐柱 | |||||||
类别 | Multi Spin (96孔) | Spin | Mini | Midi | Max | Superfine | Fine | |
图示 | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() | |
基质 | Balbdex G-25M Balbrose 6FF | G-25M 6FF | G-10 G-25M 6FF | G-10 G-25M 6FF | G-25M 6FF | G-25SF 6FF | G-25F 6FF | |
离心法① | 样本量 | 70~130μL | 0.2~0.5mL | 0.75~1.5mL | 1.75~2.5mL | 不兼容 | ||
洗脱体积 | 70~130μL | 0.2~0.5mL | 0.75~1.5mL | 1.75~2.5mL | ||||
稀释倍数 | 1 | |||||||
重力法 | 样本量 | 不兼容 | 0.1~0.3mL② 0.1~0.5mL③ | 0.4~1mL② 0.5~1.5mL③ | 1~2.5mL | |||
洗脱体积 | 1mL | 2mL | 3.5mL | |||||
稀释倍数 | 2-10 | 1.3~3 | 1.5~3.5 | |||||
Syringe | 样本量 | 不兼容 | 不兼容 | 0.25~1.5mL | 不兼容 | |||
洗脱体积 | 1~2mL | |||||||
稀释倍数 | 1.3~4 | |||||||
AKTÅ系统 | 样本量 | 不兼容 | 不兼容 | 0.25~1.5mL | 2~20mL | |||
洗脱体积 | 1~2mL | 10~30mL | ||||||
稀释倍数 | 1.3~4 | 1.5~5 | ||||||
串联使用数量 | 不兼容 | 1~5个 |
注①:Balbdex G-10不兼容离心法;
注②:Balbdex G-10;
注③:Balbdex G-25,Balbrose 6FF。
附2:我公司提供3种基质类型的脱盐柱,不同类型基质截留分子量(MWCO)的比较和选择请参见下表:
基质 | 截留分子量 | 货号 | ||||||
Multi Spin | Spin | Mini | Midi | Max | Superfine | Fine | ||
Balbdex G-10 | >0.7kDa | / | / | YTC0511 | YTC0512 | / | / | / |
Balbdex G-25 | >5kDa | YTC0499 | YTC0500 | YTC0501 | YTC0502 | YTC0503 | YTC0506 | YTC0507 |
Balbrose 6FF | >400kDa | YTC0529 | YTC0530 | YTC0531 | YTC0532 | YTC0533 | YTC0536 | YTC0537 |
附录3:我公司BalbDesalt G-25系列脱盐柱7种型号的比较和选择请参见下表:
系列名称 | BalbDesalt G-25 | ||||||
类型 | Multi Spin(96孔) | Spin | Mini | Midi | Max | Superfine | Fine |
货号 | YTC0499 | YTC0500 | YTC0501 | YTC0502 | YTC0503 | YTC0506 | YTC0507 |
填料粒径 | 70~250μm | 40~70μm | 40~140μm | ||||
树脂体积 | 500μL | 500μL | 2.1mL | 5.3mL | 8.3mL | 5mL | 70mL |
填充床尺寸 | / | / | 0.9×6.3cm | 1.3×6.6cm | 1.6×8.3cm | 1.6×2.5cm | 2.6×18cm |
柱容量 | 800μL | 800μL | 5mL | 8.5mL | 13.5mL | 5mL | 70mL |
最大样本量 | 130μL | 130μL | 0.5mL | 1.5mL | 2.5mL | 1.5mL | 20mL |
回收率 | 70~90% | 70~90% | 70~95% | 70~95% | 70~95% | 95% | 95% |
脱盐能力 | >85% | >90% | >95% | ||||
材料 | polypropylene | ||||||
贮存液 | 20% ethanol | ||||||
保存温度 | 4~30℃ |
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