产品货号:
YTB3573
中文名称:
蛋白样品还原剂
英文名称:
10X BoGel Protein Sample Reducing Agent
产品规格:
4mL|10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品可以非常有效地打开蛋白样品中的二硫键,使蛋白质处于还原状态,适用于Tris-Glycine、Bis-Tris等系统的聚丙烯酰胺凝胶的还原性蛋白电泳。
本制品与4×LDS蛋白上样缓冲液一起使用,用于常规的变性还原性PAGE胶蛋白样品的上样。另外,在用于中性pH值的PAGE凝胶电泳时,建议在内槽(上槽)电泳液中加入适量蛋白抗氧化剂(400×),以确保还原性蛋白质在电泳或转膜过程中的还原环境,保护二硫键和敏感氨基酸(如甲硫氨酸和色氨酸)不被氧化,防止条带扩散、分辨率降低。
组分 | 4mL | 10mL |
蛋白样品还原剂(10×) | 2×2mL | 10mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
- 在低温保存环境下,本制品可能会有晶体析出,属于正常情况,可室温溶解并混匀后使用;再次溶解时可能仍有部分晶体不易溶解,由于还原剂本身是过量的,即使有少量不溶解也不影响还原效果。首次使用时可以适当分装,以便于后续使用。
- 不推荐将还原性蛋白样品和非还原性蛋白样品一起进行电泳,如需一起进行电泳,要将两种蛋白加样孔隔开,防止还原性蛋白样品影响非还原性蛋白样品,且内槽(上槽)电泳液中不可加入蛋白抗氧化剂(400×)。
- 本制品有轻微毒性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
- 将本制品从-20℃取出后室温融化或4℃取出后直接使用。
- 根据实验需求按照下表配制上样体系。
成分 用量 Sample x μl 4×LDS蛋白上样缓冲液 2.5μL 蛋白样品还原剂(10×) 1μL ddH2O (6.5-x)μL 总体积 10μL - 将上样体系混匀后,70℃加热10分钟。
- 如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,加热10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再加热5~10分钟或者加入适量稀释成1×的LDS蛋白上样缓冲液后再加热3~5分钟。充分变性后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。
- 冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
- 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
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