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本制品是一种20倍浓缩的安全用于Western时湿法转膜的缓冲液，专用于Bis-Tris胶，也可用于Tris-Acetate胶。本转膜液可以回收，回收后可以再使用1～2次。

本转膜液可在转膜过程中维持中性pH环境，从而保护氨基酸侧链不受改性，防止氨基酸侧链修饰，与使用Edman化学降解法的蛋白质N-端测序技术兼容。对还原性蛋白进行转膜时，可在本转膜液中加入0.1%的抗氧化剂(货号：YTB0737)，以促进还原性蛋白向膜转移。

本转膜液由高质量的Bicine、Bis-Tris、EDTA等试剂配制而成，为20倍浓缩溶液，配制时无需调整pH值。如需粉末装，推荐使用Bis-Tris胶专用转膜液粉剂(货号：YTB3572)。

对于Bis-Tris胶和Tris-Acetate胶，也可以使用Tris-Glycine缓冲系统的Western转膜液(货号：YT063)进行转膜。

• 不推荐将还原性蛋白样品和非还原性蛋白样品一起进行转膜。对还原性蛋白进行转膜时，可在配制转膜液时加入0.1%的抗氧化剂(货号：YTB0737)。
  
• 含有10%乙醇或甲醇的转膜液可在印迹模块中实现单块凝胶的最佳转移效果。如果需转移2块凝胶，请将乙醇或甲醇含量增加到20%，以确保蛋白的有效转移。
  
• 本制品适用于Bis-Tris和Tris-Acetate凝胶系统的转膜液，不适用于其它凝胶系统。
  
• 如果转膜时设定的电流或电压较大，会有比较明显的产热现象，即产生所谓的焦耳热效应，并导致转膜液的电阻变小，最终影响转膜效率、转膜液的缓冲能力、甚至过热时导致凝胶熔化或黏附在膜上。因此建议转膜时，在转膜槽内用冰盒降温，并将转膜槽置于冰浴中。同时也可以考虑转膜液配制好后先在4℃或者冰浴预冷。
  
• 使用本制品转膜时，如果设定恒流为300mA，无论是同一个转膜槽中1或2块胶转膜，电压在开始时一般为100V左右。由于转膜过程中，转膜液温度会逐渐升高，电阻变小，所以结束时电压一般为120V左右。转膜效率和电场强度(用E表示)相关，而电场强度主要和电压及电极之间的距离相关，即E=U/d。
  
• 由于用于转膜的电源品牌和型号的不同，一方面最高电流差异较大，另一方面功率也会有较大差别。通常大功率的电源相对贵一些，也更适合用于转膜。比如Bio-Rad Powerpac Basic Power Supply的最大功率是75W，在设定恒流为400mA时，电压超过187V时就会超过电源的最大功率而出现过载保护。有些电源会自动降低电压或电流，有些则会报错并停止转膜。对于出现停止转膜的情况，需要调低电流或电压，或者选择功率更大的电源。
  
• 转膜时转膜液的温度、凝胶的参数(如数量、厚度、离子浓度、丙烯酰胺浓度等)、滤纸的厚度、同时使用的转膜槽数量、转膜液的离子浓度、转膜液的体积、转膜液使用的次数等都可能会影响电流和电压。其中一个电泳同时使用的转膜槽数量是最关键因素，如果是恒流，每增加一个转膜槽，每个槽的电流和电压都会相应减少一份。如果需要同时使用2个或以上的转膜槽，建议使用高电流的大功率电源，或者设定较低的电流或电压进行比较长时间的转膜。
  
• 转膜时，如果出现报错而停止，需要根据情况查看是否是电压或电流过载，或者是如转膜液过多或过少、转膜槽的短路或断路等异常情况。

• 请按照下表配制转膜液。
  

  成分	还原样品	非还原样品
  20×Bis-Tris胶转膜缓冲液	50mL	50mL
  抗氧化剂(400×)	1mL	-
  Ethanol or Methanol	100～200mL	100～200mL
  H2O	至1L	至1L

  • 如果配制好的转膜液使用前能4℃预冷，转膜效果更好。没有用完的转膜液可在常温或4℃保存，通常两周内可以正常使用。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时，应该丢弃。
• 转膜条件：300mA恒流或100V恒压1小时(推荐使用外置冰浴)即可很好地完成转膜。对于小分子量蛋白，可以适当减少转膜时间；同样对于大分子量蛋白，可以适当增加转膜时间。本转膜液也适合于快速转膜，如500mA恒流15分钟即可。