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本制品提供了简单而又超快速地制备SDS-PAGE浓缩胶（上层胶）所需的主要试剂，包括Tris-HCl(pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等。本浓缩胶预混液已经把SDS-PAGE凝胶浓缩胶配制所需的Tris-HCl (pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合好，使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物，如过硫酸铵替代物)和TEMED替代物即可简单快速地完成浓缩胶的配制。

本制品用于配制最常用的5%浓度浓缩胶，如您需要配制特殊浓度的浓缩胶，可以考虑单独购买30% Acr-Bis(29:1)、10% SDS和1M Tris-HCl(pH6.8)等进行特殊浓度SDS-PAGE凝胶浓缩胶的配制。本浓缩胶预混液可以直接配合不同浓度的SDS-PAGE分离胶预混液使用，轻松超快速完成各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。

• 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE分离胶(即下层胶)。
  不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下：
  

  SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
  6%胶	50～150kD
  8%胶	30～90kD
  10%胶	20～80kD
  12%胶	12～60kD
  15%胶	10～40kD

• 称取适量过硫酸铵或其替代物，如过硫酸铵替代物(货号：YTB3599)，用双蒸水或其它高纯度的水配制10%溶液。过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效，需注意存放及时间限制。
  
• 参考下表，在分离胶凝固后，在SDS-PAGE浓缩胶预混液中，按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液，按照0.1%的比例加入相应量的TEMED。例如10mL SDS-PAGE浓缩胶预混液中，加入100μL 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μL TEMED，适当混匀。去除分离胶上面覆盖的液体，尽量去干净，然后倒入添加了10%过硫酸铵或其替代物溶液和TEMED的SDS-PAGE浓缩胶预混液，插入梳子待凝固。浓缩胶凝固后，则表明制胶步骤结束，可以准备进行后续的电泳了。通常10～30分钟内胶会凝固。
  
  • 具体的凝固时间和温度及光照有关，说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间，当室温低于25℃时，可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量，例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍，15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。

  成分	配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(mL)
  SDS-PAGE浓缩胶预混液	2	3	4	6	8	10
  10%过硫酸铵或其替代物	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
  TEMED	0.002	0.003	0.004	0.006	0.008	0.01

• 配制好的凝胶如果当天不能使用，可以在4℃保存1～2天后使用。