产品货号：
WH0180
中文名称：
BCA蛋白定量试剂盒
英文名称：
BCA Protein Assay Kit
产品规格：
50次微管检测/500次微板检测|250次微管检测/2500次微板检测
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是根据BCA法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒的原理是蛋白质分子中的肽键结构在碱性环境下能与Cu2+络合生成络合物，将Cu2+还原成Cu+，而BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在562nm处有最大光吸收值，该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。1小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA）溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为20～2000μg/ml。本试剂盒适用于测定含有较高浓度去垢剂蛋白溶液中的蛋白浓度。
产品特点：
·便捷快速：与Lowry法相比，该方法可在1小时内完成蛋白质定量检测，工作液配制后24h内使用无影响。
·灵敏准确：测定范围是20～2000μg/ml（562nm读数）。在测定范围内有良好的线性关系，变异系数小。
·兼容性好：与Bradford法相比，对去垢剂耐受能力大为提高，在Tween20低于4%，NP40低于5.0%，SDS低于4%，Triton X-100低于4%的浓度范围内，即可获得准确定量结果（其余物质耐受度详见说明书）。使用微板法测定时将体积按比例减小。
产品组成：
WH0180-1试剂盒所携带的试剂可满足50 rxn微管检测和500 rxn微板检测。
WH0180-2试剂盒所携带的试剂可满足250 rxn微管检测和2500 rxn微板检测。
保存条件：BCA试剂A和BCA试剂B室温保存,BSA标准品-20℃保存。
操作步骤：
1．标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对BSA标准品进行稀释：
2．配制BCA工作液：依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50:1配制适量BCA工作液，并充分混匀。
注：配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀
3．标准比色杯测定方法：
①吸取0.1ml的每种标准品和待测样品置于合适的管中。
②加入2.0 ml的BCA工作液,彻底混匀。
③加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
4．微管测定方法：
①分别取25μl表格中新鲜配制的BSA标准液和待测样品，加入到96孔板中。
②每孔中加入200 μl BCA工作液，并充分混匀。
③加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项：
1．测值范围：OD540-OD590,分别测定OD540，OD562以及OD590的吸收值，标准曲线均为线性，OD562测值最高。
2．标准曲线的线性范围为20-2000μg/ml。
3．工作液配制之后24 h内使用对标准曲线无影响。
适用范围：
本检测方法可耐受的干扰物质浓度表：
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产品特点：
·便捷快速：与Lowry法相比，该方法可在1小时内完成蛋白质定量检测，工作液配制后24h内使用无影响。
·灵敏准确：测定范围是20～2000μg/ml（562nm读数）。在测定范围内有良好的线性关系，变异系数小。
·兼容性好：与Bradford法相比，对去垢剂耐受能力大为提高，在Tween20低于4%，NP40低于5.0%，SDS低于4%，Triton X-100低于4%的浓度范围内，即可获得准确定量结果（其余物质耐受度详见说明书）。使用微板法测定时将体积按比例减小。
产品组成：
| 组分 | WH0180-1 | WH0180-2 |
| BCA试剂A | 100ml | 500ml |
| BCA试剂B | 3ml | 15ml |
| BSA标准品（2mg/ml) | 2×1ml | 10×1ml |
WH0180-1试剂盒所携带的试剂可满足50 rxn微管检测和500 rxn微板检测。
WH0180-2试剂盒所携带的试剂可满足250 rxn微管检测和2500 rxn微板检测。
保存条件：BCA试剂A和BCA试剂B室温保存,BSA标准品-20℃保存。
操作步骤：
1．标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对BSA标准品进行稀释：
| 管号 | 稀释剂 | BSA（来源) | BSA终浓度（μg/ml) |
| A | 0μl | 300μl（母液) | 2000 |
| B | 125μl | 375μl（母液) | 1500 |
| C | 325μl | 325μl（母液) | 1000 |
| D | 175μl | 175μl（B管) | 750 |
| E | 325μl | 325μl（C管) | 500 |
| F | 325μl | 325μl（E管) | 250 |
| G | 325μl | 325μl（F管) | 125 |
| H | 400μl | 100μl（G管) | 25 |
| I | 400μl | 0 | 0（空白对照) |
2．配制BCA工作液：依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50:1配制适量BCA工作液，并充分混匀。
注：配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀
3．标准比色杯测定方法：
①吸取0.1ml的每种标准品和待测样品置于合适的管中。
②加入2.0 ml的BCA工作液,彻底混匀。
③加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
4．微管测定方法：
①分别取25μl表格中新鲜配制的BSA标准液和待测样品，加入到96孔板中。
②每孔中加入200 μl BCA工作液，并充分混匀。
③加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项：
1．测值范围：OD540-OD590,分别测定OD540，OD562以及OD590的吸收值，标准曲线均为线性，OD562测值最高。
2．标准曲线的线性范围为20-2000μg/ml。
3．工作液配制之后24 h内使用对标准曲线无影响。
适用范围：
本检测方法可耐受的干扰物质浓度表：
| 类别 | 干扰物质 | 耐受浓度 |
| 盐/缓冲液 | HEPES（pH7.9) | 100mM |
| PIPES（pH6.8) | 100mM | |
| HCl | 100mM | |
| NaOH | 100mM | |
| Sodium citrate | 100mM | |
| NaCl | 1M | |
| TRICINE（pH8.0) | 20mM | |
| Sodium Acetate | 200mM | |
| Guanidine.HCl | 4M | |
| Tris | 50mM | |
| 螯合剂 | EDTA | 10mM |
| 还原剂 | DTT | 0.2mM |
| 去垢剂 | NP40 | 5% |
| TRITON X-100 | 4% | |
| SDS | 4% | |
| TWEEN20 | 4% | |
| 混合物& 极性化合物 | PMSF | 1mM |
| Acetone | 10% | |
| Ethanol | 10% | |
| Glycerol | 10% | |
| Urea | 3M | |
| DMSO | 10% | |
| Sucrose | 40% |
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