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本试剂盒包括SDS-PAGE凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的变性PAGE凝胶，方便、快捷。本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS，使用时不用另外加入。

• 10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定，应尽量减少室温存放时间，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
  
• PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关；在其它条件不变的情况下，可通过改变APS及TEMED的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作；附表中的APS及TEMED量可供参考，应根据实际操作情况做适当的调整。
  
• 在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
  
• 在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。
  
• 丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
  
• 本制品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

• 灌制分离胶
  各试剂使用量请参考附表2
  
  • 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
    注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
    
  • 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer和纯水在小烧杯或试管中混合。
    
  • 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
    
  • 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的水层，使凝胶表面保持平整。
    
  • 静置30～60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
• 灌制浓缩胶
  各试剂使用量请参考附表3
  
  • 去除覆盖在分离胶上的水层。
    
  • 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
    
  • 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
    
  • 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
    
  • 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
    
  • 静置10～20分钟，等待浓缩胶聚合。
    
  • 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
    
  • 进行常规电泳操作。