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红色荧光标记人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是标记荧光探针Dil(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL，可以用来观察培养细胞的LDL结合位点，或筛选LDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平，或检测组织内的受体水平。DiI-LDL是研究细胞内吞作用非常好的标记物。

我司提供的Human DiI-LDL为无菌包装，可以直接稀释使用。除提供DiI-LDL，我们还提供不带标记的LDL，以及修饰化的LDL如乙酰化LDL(Ac-LDL)，以及氧化修饰的LDL(Ox-LDL)。

低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein，简称为LDL)是通过脂蛋白酯酶的水解作用，脱去极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂，释放游离脂肪酸转化而来的。因甘油三酯的去除使得胆固醇所占比例提高，增加颗粒本身密度，从而得到LDL。LDL与脊椎细胞表面的受体特异性结合，然后通过受体介导的内吞作用将胆固醇运输到全身各处细胞。因此，LDL可以用来研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，血浆来源的LDL还可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。

浓度	0.8～3.0mg/mL
外观	乳状液体
吸光度比例	Dil/Protein=555nm/275nm=1.30
缓冲液组分	0.02mM EDTA in PBS,pH7.4

纯化的人健康血浆来源的LDL直接标记上DiI荧光探针，然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物，并滤膜过滤除菌。纯化的DiI-LDL溶于含0.02mM EDTA的PBS，pH7.4中。

组分	规格
DiI标记人源低密度脂蛋白	500μg
说明书	1份

保存：4℃无菌避光，有效期6周。千万不可冻存！使用时一定要无菌操作。

• 本品的稀释工作液极不稳定，建议即配即用；
  
• 长期贮存可能会有沉淀析出，属于正常现象，低速离心2min去除沉淀即可使用；
  
• LDL与LDL受体的结合需要Ca²⁺和Mn2+的参与，过量EDTA的存在会抑制其结合；
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操。
  
• 本制品仅作科研用途!

• 工作液制备：无菌条件下，将DiI-LDL用细胞培养基稀释至20～40μg/mL。
  
• 细胞准备：吸除培养板内培养基，向活细胞内加入上述LDL，37℃培养4～5小时。
  
• 孵育结束，吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。
  
• 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
  
  • 荧光显微镜观察
    采用标准的罗丹明激发：发射滤光片(或建议使用波长为：Ex/Em=549nm/565nm)；若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有机溶剂。注：需设阳性细胞以做对照。
    
  • 细胞分选(流式细胞术)
    胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液，选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照，从而进行流式分选设门(gate)。(建议使用波长为Ex:488/514/549nm;Em:565nm)。

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