产品货号：
SY0434
中文名称：
抗V5标签亲和纯化凝胶
英文名称：
Anti-V5 Affinity Gel
产品规格：
1mL|5mL|25mL|100mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品由高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体与Sepharose 4B gel通过供价偶联制备，本制品具有较高的V5标签融合蛋白加载容量(至少为0.5mg protein/mL凝胶)，杂蛋白非特异结合少，可用于带有V5标签的融合蛋白免疫沉淀(IP)和纯化。推荐使用量：每500μL蛋白粗体液需使用5μL凝胶。
| 克隆号 | 10B5 |
| 亚型 | Mouse IgG1 |
| 纯化方法 | Protein A |
| 抗体浓度 | 7.5g抗体/L凝胶 |
| 应用 | 蛋白纯化，免疫沉淀(IP) |
| 蛋白结合量 | ≥0.5mg蛋白/mL凝胶 |
| 储存缓冲液 | 10mM Na3PO4，150mM NaCl，50%甘油，pH7.4，含有0.02%(w/v)叠氮钠 |
| 组分 | 1mL | 5mL | 25mL | 100mL |
| 抗V5标签亲和纯化凝胶 | 1mL | 5mL | 25mL | 100mL |
| 说明书 | 1份 | |||
保存：-20℃，有效期1年。禁止在不含甘油的溶液中冻存。
- 轻微重悬Anti-V5 Affinity Gel，形成均一溶液。转移10μL混合液(5μL gel)至新的离心管中。
- 加入600μL TBS，轻轻的重悬Anti-V5 Affinity Gel，10000rpm离心30 s，弃上清，重复上述步骤3～4次。
注意：尽可能去除上清，但不要吸到凝胶。重复该步骤3～4次。 - 在上述沉淀中加入200～1000μL细胞裂解液。4℃，轻摇孵育2小时。
- 10000rpm离心30 s，上清液转移到新的离心管中保存以后检测。
- 凝胶沉淀用0.5mL TBS洗3～4次，直至上清OD280 <0.05。
- 洗脱：具体选择哪种洗脱条件取决于目的蛋白的特性或下游应用。
- 加入100μL V5多肽(150μg/mL，货号：SY0425)洗脱V5融合蛋白，4℃轻摇孵育30min，10000rpm离心30 s，收集上清。
- 用于SDS-PAGE电泳：加入10μL 2×蛋白上样缓冲液，煮沸5min。10000rpm离心30 s，小心转移上清，用于SDS-PAGE检测。上样缓冲液中SDS会破坏抗体，所以亲和纯化凝胶不能重复使用。
- 加入100μL V5多肽(150μg/mL，货号：SY0425)洗脱V5融合蛋白，4℃轻摇孵育30min，10000rpm离心30 s，收集上清。
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