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BCA蛋白检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐，是目前国际上最流行的蛋白质定量检测方法。

碱性条件下，蛋白将Cu²⁺还原为Cu⁺，Cu⁺与BCA试剂形成紫色的络合物，562nm处有最大吸收峰，依据吸光度与浓度成正比，通过测吸光度即可计算待测蛋白的浓度。

• 快速简单：比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
  
• 灵敏度高：检测浓度下限达到20μg/mL，最小检测蛋白量达到0.5μg，在20～2000μg/mL浓度范围内有良好的线性关系。
  
• 本法测定蛋白浓度不受绝大部分化学物质的影响，包括不受离子型和非离子型去污剂影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20,60,80。
  
• 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法。
  
• 鉴于试剂盒灵敏度高，试剂配制所用器皿必须无蛋白污染。
  
• 标准液浓度会有变化，请按标准液管壁标签上标示实际浓度计算。

含562nm波长的分光光度计及0.5cm光径比色皿（或酶标仪及96孔板）、37℃水浴锅或恒温箱、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、生理盐水（0.9%）或PBS（0.1M）、涡旋混匀器、试管或离心管。

• 试剂一应用液：用前一支粉剂加一瓶稀释液溶解备用，4℃保存。
  • 试剂一粉剂溶解较慢，建议提前半小时或一小时配好。
• 试剂三应用液：使用时用蒸馏水5倍稀释后备用，4℃保存。
  
• 检测工作液：按试剂一应用液∶试剂二＝50∶1的比例配制，混匀后备用，现用现配。

• 动物组织样本：准确称取组织重量，按重量(g)∶体积(mL)＝1∶9的比例，加入9倍体积的匀浆介质（匀浆介质推荐0.1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液或生理盐水等），冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液再用匀浆介质按1∶9稀释成1%组织匀浆，或按1∶19稀释成0.5%的组织匀浆，待测（具体浓度以预实验为准）。
  
• 植物组织样本：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(mL)＝1∶9的比例，加入9倍体积的匀浆介质（匀浆介质推荐0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水等），冰水浴条件下机械匀浆，3500转/分，离心10分钟，取上清液再用生理盐水按1∶9稀释成1%组织匀浆，或按1∶19稀释成0.5%的组织匀浆，待测（具体浓度以预实验为准）。
  
• 血清（浆）样本：按血清(浆)∶生理盐水＝1︰49的比例稀释（或1∶99稀释），待测（具体浓度以预实验为准）。
  
• 其它液体样本：按比例稀释，测定范围为20～2000μg/mL，（不同的样本稀释度不一样），请在批量测试前先做1～2个样本的预实验（具体浓度以预实验为准）。
  
• 培养细胞样本前处理：将收集好的细胞用等渗缓冲液（推荐0.1mol/L pH7～7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水）清洗1～2次；1000转/分，离心10分钟，弃上清，留细胞沉淀，加入匀浆介质（推荐加入0.1mol/L pH7～7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水），冰水浴条件下超声破碎(功率300W，5秒/次，间隔30秒，重复3～5次)(也可根据不同仪器细胞超声处理的步骤进行)或手动匀浆，制备好的匀浆液不离心，待测（如浊度较大也可离心后测定，具体浓度以预实验为准）。

• 组织或细胞样本提取时，匀浆介质不局限于上述所列的生理盐水和磷酸盐缓冲液，其它的（原则上不干扰试剂反应的都可以）一样可以检测。

• 按下表加入各成分，配制反应体系。
  

  成分(μL)	空白管	标准管	测定管
  蒸馏水	20
  标准液		20
  待测样本			20
  检测工作液	250	250	250

• 漩涡混匀，37℃孵育30分钟。
  
• 向各反应管中加入750μL试剂三应用液。
  
• 漩涡混匀，静置5分钟，562nm波长，0.5cm光径，蒸馏水调零，分光光度计测定各管吸光度值。

• C_标准：标准液浓度，μg/mL（浓度见标签）；
• N：样本测试前稀释倍数。