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即用型Bradford法蛋白定量试剂盒(去垢剂兼容型)图片
产品货号:
S20010
中文名称:
即用型Bradford法蛋白定量试剂盒(去垢剂兼容型)
英文名称:
Ready-to-Use Bradford Protein Assay Kit(Detergent-Compatible)
产品规格:
800T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本制品对传统的Bradford方法进行了改良,最佳检测范围为100~500μg/mL,在保留其检测速度快,兼容高浓度还原剂等优点的同时,还能耐受1% SDS、1% NP-40、1% Triton X-100、1% Brij35和1% Tween 20等各种常用去垢剂,从而可以与市面上大多数蛋白裂解液兼容。同时,本试剂盒配备有一系列梯度浓度的蛋白质标准品溶液(BSA溶液),即取即用,无需稀释,方便快捷。



检测原理:

Bradford蛋白浓度测定方法,是常用的经典蛋白浓度检测方法。其原理是考马斯亮蓝G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸结合后,产生蓝色化合物,化合物颜色深浅程度与蛋白浓度在一定范围内有较好的线性关系,因此可通过检测595nm的最大光吸收值来计算蛋白质浓度。



产品特点:
  • 方便快捷:提供即用型标准品,省去繁琐的稀释步骤。
  • 兼容性好:与金属离子、还原剂、螯合剂及去污剂兼容性较好。


产品组成:
组分规格
Bradford定量试剂250mL
即用型BSA标准品1(0μg/mL)1mL
即用型BSA标准品2(100μg/mL)
即用型BSA标准品3(150μg/mL)
即用型BSA标准品4(200μg/mL)
即用型BSA标准品5(300μg/mL)
即用型BSA标准品6(400μg/mL)
即用型BSA标准品7(500μg/mL)

保存:定量试剂置于4℃,标准品置于-20℃,有效期一年。

注意事项:
  • 如通过分光光度计使用本制品测定蛋白浓度,需根据比色皿的最小检测体积,适当扩大反应体系,确保蛋白样品(标准品)与Bradford定量试剂的用量体积比为1:30即可。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
  • 当去垢剂浓度大于1%时,部分去垢剂和去垢剂组合仍然适用于本制品,但可能会出现标准曲线斜率减小的现象,影响结果准确度。
  • 试剂在低温条件或长期保存出现沉淀时,请上下翻转混匀溶解。
  • 建议每次测定蛋白样品浓度时,都须绘制标准曲线,以获得准确数据。


使用方法:
以微孔酶标仪法为例:
  • 分别取即用型BSA标准品1~7各10μL加到96孔板中。
    孔号1234567
    添加物标准品1标准品2标准品3标准品4标准品5标准品6标准品7
    体积10μL
    BSA终浓度(μg/mL)0100150200300400500
    BSA标准品使用前须充分溶解摇匀。

  • 用1×PBS或0.9%生理盐水将样品适当稀释(可以多作几个梯度,如2倍、4倍、8倍稀释),加10μL到96孔板的样品孔中。
  • 各孔加入300μL Bradford定量试剂,充分混匀,盖上96孔板盖,室温孵育3~5min。
  • 用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A595,注意要减去空白对照(标准品1 + Bradford定量试剂)的吸光度。
  • 以蛋白标准品的浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线,得到标准曲线线性公式及R2值,计算样品的蛋白浓度。
    计算样品蛋白浓度时,所测得的浓度值需乘以样品的稀释倍数。

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