产品货号：
RFT601
中文名称：
5×快速半干转转膜缓冲液
英文名称：
5×TrueBlot Fast Semi-Dry Transfer buffer
产品规格：
500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品特点：
准备工作：
使用方法：
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5×TrueBlot快速半干转转膜缓冲液使用独特配方，使用半干转法方法，能在10～20分钟内高效快速地将蛋白转移到印迹膜（PVDF膜或NC膜）上。
产品特点：
- 安全环保：快速转膜液可以不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。
- 兼容性好：快速转膜液能兼容Tris-甘氨酸胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
- 节省时间：快速转膜液能在10～20分钟内完成蛋白的转印。
准备工作：
半干转转印滤布或2张半干转专用超厚滤纸(厚度2.4mm)，裁好的转印膜，足够的1×快速半干转转膜缓冲液，无水甲醇，无水乙醇。
使用方法：
- 按照下表顺序配制1×快速转膜液
成分 用量 5×转膜缓冲液 100mL 超纯水 约300mL 无水乙醇或无水甲醇 100mL 超纯水 至500mL - 按照顺序加入各种溶液，如果加入转膜液后不加水而是加入醇将会产生沉淀。
- 乙醇和甲醇两者选择其一，用乙醇更环保，用甲醇转膜效果更好。
- 配好的转膜缓冲液4℃预冷30～60分钟再使用，将会大大降低转膜时的发热量。
- 按照顺序加入各种溶液，如果加入转膜液后不加水而是加入醇将会产生沉淀。
- 将滤布或滤纸浸泡在1×快速转膜液中，完全浸湿3～5分钟。
- PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒，随后浸泡在1×快速转膜液中，平衡3～5分钟。NC膜无需处理，直接浸泡在转膜缓冲液中，平衡3～5分钟。
- 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS，随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。水中漂洗时间不要过长，否则可能会影响分子量较大蛋白的转移。
- 按照以下顺序做好转印三明治结构：
排列顺序：1负极（阴极）-2一张超厚滤纸或四层滤布-3凝胶-4转印膜-5一张超厚滤纸或四层滤布-6正极（阳极）
凝胶在转印槽中的排列：一板胶尽量排布在转印槽中间位置；两板胶把小片段靠近（foot-to-foot）排布在转印槽中间位置。 - 用滚轮赶出气泡。
- 半干转推荐使用恒流转移：
分子量范围和凝胶厚度 一块小型胶（7.3×8.5cm） 两块小型胶（7.3×8.5cm）
或一块中型胶（8.5×13.5cm）1.5mm凝胶 下列条件基础上增加5～10分钟 下列条件基础上增加5～10分钟 1mm凝胶 高分子量 大于130kD 恒流1.3A，20分钟 恒流2.5A，20分钟 混合分子量 5～130kD 恒流1.3A，15分钟 恒流2.5A，15分钟 低分子量 小于30kD 恒流1.3A，10分钟 恒流2.5A，10分钟 不同厂家半干转仪器设置可能有所不同，请根据厂家说明书适当调整。
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