产品货号:
QN1222
中文名称:
SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(AP显色)
英文名称:
SABC(Mouse/Rabbit IgG)-AP Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是百奥莱博基于SABC-AP实验开发的,适合于一抗类型为小鼠/兔IgG的免疫组化实验及碱性磷酸酶(AP)显色的试剂盒。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。

| 组分 | 规格 |
| 封闭液(5% BSA) | 10mL |
| Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液 | 200μL |
| SABC-AP浓缩液 | 100μL |
| 稀释液 | 30mL |
| 1×AP反应缓冲液 | 30mL |
| 25×BCIP | 1mL |
| 25×NBT | 1mL |
保存:-20℃,有效期1年。

如果染色背景过高,在SABC反应之后,AP显色之前,用加有0.01~0.02% TWEEN-20的TBST(pH7.2~7.4)洗涤切片4次,TBS洗2次,然后AP显色。因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。

一、石蜡切片
- 切片常规脱蜡至水(三次二甲苯,三次乙醇)。
- 可选步聚:
- 热修复抗原,
- 酶消化,
- 跳过此步,直接进入下一步。
- 热修复抗原,
- 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体,不洗。
- 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。TBS(pH7.2~7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。具体稀释度和孵育时间参考一抗生产厂家说明书。)
- 根据用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1mL稀释液加入10μL Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20~37℃ 30分钟。TBS(pH7.2~7.4)洗2分钟×3次。
- 根据使用量,用稀释液将SABC-AP浓缩液按1:100稀释成工作液(1mL稀释液加入10μL SABC-AP浓缩液混匀。
此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-AP工作液,20~37℃,30分钟。TBS(pH7.2~7.4)洗5分钟×4次。 - 根据用量,1mL AP缓冲液中加入40μL NBT溶液,混匀后再加入40μL BCIP溶液。此工作液现用现配。室温显色,镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤终止反应。
二、对于冰冻切片
固定后,TBS漂洗两次,接上述第二步。
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