产品货号:
QN1082
中文名称:
高效RIPA裂解液(组织/细胞)
英文名称:
RIPA buffer
产品规格:
20mL|100mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品组成:
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
使用说明:
相关搜索:高效RIPA裂解液(组织/细胞),RIPA buffer
本制品为高效组织细胞裂解液,主要用于从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白,本制品配有一支PMSF。
产品组成:
| 组分 | 20mL | 100mL | 500mL |
| 高效RIPA裂解液(组织/细胞) | 20mL | 100mL | 500mL |
| PMSF(100×) | 0.3mL | 1.5mL | 5mL |
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
- 本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
- 如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
- 如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
- 根据使用量,取每1mL RIPA加入10μL PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用(PMSF现用现加)。
使用说明:
- 样品前处理:
- 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
- 悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。
- 组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。
- 如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
- 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
- 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
- 后处理:将裂解后的样品10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
相关搜索:高效RIPA裂解液(组织/细胞),RIPA buffer
