产品货号:
QN1081
中文名称:
RIPA裂解液
英文名称:
RIPA buffer
产品规格:
100mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品组成:
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
使用方法:
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RIPA组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
产品组成:
| 组分 | 100mL | 500mL |
| RIPA裂解液 | 100mL | 500mL |
| PMSF(100mM) | 1mL | 5mL |
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
- 如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
- 根据使用量,取每1mL RIPA裂解液加入10μL PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用(PMSF现用现加)。
使用方法:
- 样品前处理:
- 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
- 悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5~10×105细胞/管,然后再裂解。
- 组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
- 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
- 后处理:将裂解后的样品10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。
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