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本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于蛋白激酶和磷酸激酶的研究。

• 实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境。
  
• PSMF(有毒)现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。

• 组织总蛋白的提取
  
  • 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5～1mL的新配制的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作。
    
  • 将组织匀浆液移入1.5mL的EP管中，4℃条件下12000g离心30min。
    
  • 吸取上清至新的管中。
    
  • 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
    
    提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。
• 细胞总蛋白的提取
  
  • 裂解液的用量：10⁷个细胞需要裂解液1mL。
    
  • 贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20～30min。
    
  • 悬浮细胞：4℃条件下400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3～4次。
    裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃条件下12000g离心30min。
    
  • 将上清移入新的EP管中。
    
  • 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
    
    提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。