产品货号：
QN1067
中文名称：
磷酸化蛋白提取试剂盒
英文名称：
Phosphorylated Protein Extraction Kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
在1mL的冷裂解液中各加入10μL的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF。混匀，放置在冰上备用。
相关搜索：磷酸化蛋白提取试剂盒，磷酸化蛋白提取，Phosphorylated Protein Extraction Kit
本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
产品组成：
| 组分 | 50T | 100T | 保存 |
| 裂解液 | 50mL | 100mL | 2～8℃ |
| 磷酸酶抑制剂(100×) | 0.5mL | 1mL | -20℃ |
| 蛋白酶抑制剂(100×) | 0.5mL | 1mL | |
| PMSF(100×) | 0.5mL | 1mL |
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
- 实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境。
- PMSF毒性低于DFP，需现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。
使用方法：
在1mL的冷裂解液中各加入10μL的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF。混匀，放置在冰上备用。
- 组织总蛋白的提取
- 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5～1mL的新配制的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作。
- 将组织匀浆液移入1.5mL的EP管中，4℃，12000g离心30min。
- 吸取上清至新的管中。
- 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。
- 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5～1mL的新配制的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作。
- 细胞总蛋白的提取
- 裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1mL。
- 贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液。在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20～30min。
- 悬浮细胞：4℃,400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3～4次。
- 裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃,12000g离心30min。
- 将上清移入新的EP管中，进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。
- 裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1mL。
相关搜索：磷酸化蛋白提取试剂盒，磷酸化蛋白提取，Phosphorylated Protein Extraction Kit