产品货号:
KFS099
中文名称:
新型超灵敏ECL检测试剂盒
英文名称:
Super ECL Assay kit
产品规格:
100ml|200ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒用于Western blot的化学发光检测,比普通超敏型ECL显色法灵敏度更高,10-15g级检测水平。原理是采用新型发光底物(Luminol),其与辣根过氧化物酶反应时产生很强的光信号,在暗房中对X-光片感光,以此检测微量蛋白而获得理想的实验结果。
本试剂盒在ECL检测液的基础之上加以改进,具有灵敏度高,持续时间长的特点,同时试剂盒的稳定性也有很大的提高。
组分 | 100mL | 200mL |
Stock A | 50mL | 100mL |
Stock B | 50mL | 100mL |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
- 印迹膜制备
按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作,接着封闭过夜,加入一抗,室温振荡1h,用PBST洗涤四次,每次10min;然后加入HRP二抗交联物,室温振荡1h,用PBST洗涤四次,每次10min。 - ECL工作液的配制
取1.5mL的eppendorf管,然后加入500μL Stock A液和500μL Stock B液,混合后即为ECL工作液(配制后请尽快使用)。将膜片平铺,滴加ECL工作液使其将膜片完全覆盖(每平方厘米膜片至少使用0.1mL ECL工作液)。 - 蛋白信号显现
- 用平头镊钳住膜片,垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。
- 置膜片于二层保鲜膜之间,小心赶尽气泡。
- 将膜片吸附蛋白面朝上,置于X光片盒中。
- 于暗室中压上X光片。
- 曝光:如果在暗室中可肉眼看到比较亮的条带,建议曝光1分钟~3分钟;如果肉眼看到的带比较淡,建议曝光3~10分钟;如果很淡或基本看不到带,建议曝光10分钟~30分钟。最后可以根据结果调节曝光时间,再次曝光显影。
- 用平头镊钳住膜片,垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。
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