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柠檬酸钠-EDTA抗原修复液是一种常用的抗原修复液，结合了柠檬酸钠和EDTA进行抗原修复的优点，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和EDTA，结合了两者修复抗原的优点，并经过适当优化，可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白。

• 抗原修复过程可使用染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
  
• 抗原修复液使用前必须用重蒸水或MilliQ水稀释40倍，配制成抗原修复液(1X)。

• 对于石蜡切片：
  
  • 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡5分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟，两次。90%乙醇5分钟，两次，70％乙醇5分钟，一次。蒸馏水5分钟，两次。
    
  • 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95～100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10～30分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95～100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20～30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
  
  
• 对于冰冻切片：
  用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95～100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10～30分钟内，最佳加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95～100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20～30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
  
• 对于其它样品抗原修复，可参考石蜡切片或冰冻切片步骤进行。