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2×RIPA裂解液采用优质原料配制，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。2×RIPA裂解液中已含常用磷酸酶抑制剂，pH7.4。

• 细胞裂解
  
  • 裂解液制备：每1mL冷的1×RIPA裂解液中加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
    
  • 取5～10×10⁶个细胞，在4℃，1000g条件下离心5～10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
    
  • 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
    
  • 每5×10⁶个细胞中加入500μL冷的裂解液（每10⁶个细胞，大约10mg或10μL压积，加100μL RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μL～150μL，或一个75cm2培养瓶加1mL。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15～30分钟。
    
  • 在4℃，14000g条件下离心10～15分钟。
    
  • 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
• 组织裂解
  
  • 裂解液制备：每1mL冷的1×RIPA裂解液加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
    
  • 取100mg组织样本剪碎，加入1mL裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
    
  • 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃条件下振荡15～20分钟。
    
  • 在4℃，14000g条件下离心10～15分钟。
    
  • 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
    上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。