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本试剂盒适用于从各种真菌中提取总蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种真菌样本蛋白，提取过程简单方便，可在1小时内完成。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、报告基因检测、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系本公司，选择其他货号产品。

• 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
  
• 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
  
• 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
  
• 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

• 提取液制备：每500μL真菌蛋白提取液中加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，混匀后备用。
  
• 取培养真菌样本，在4℃，3000×g条件下离心5～10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集菌体。
  注：菌体数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
  
• 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
  
• 将菌体置于研钵中用液氮研磨5分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件，可直接用蛋白提取液研磨。
  
• 每100mg菌体中加入500μL蛋白提取液，混匀后，振荡30～45分钟。
  
• 在14000×g条件下离心15分钟。
  
• 将上清吸入另一干净离心管，即可得到真菌总蛋白。
  
• 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
  注：蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。