产品货号:
HR0023
中文名称:
组织细胞质蛋白提取试剂盒
英文名称:
Cytoplasmic Protein Extraction Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
组分 | 50T | 100T |
胞浆蛋白提取液 | 10mL | 20mL |
蛋白酶抑制剂混合物 | 100μL | 200μL |
保存:-20℃,有效期1年。
- 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
- 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
- 细胞蛋白提取
- 取5~10×106个细胞,在4℃,500×g条件下离心2~3分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
- 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
- 每20μL细胞压积中加入200μL冷的胞浆蛋白提取液,2μL蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡15秒,置冰上10分钟。
- 再次高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,16000×g条件下离心5分钟。
- 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白,请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
- 取5~10×106个细胞,在4℃,500×g条件下离心2~3分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
- 组织蛋白提取
- 取适量组织样本剪碎,加冷PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
- 在4℃,500×g条件下离心2~3分钟,弃上清。
- 按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。
注:上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
- 取适量组织样本剪碎,加冷PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
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