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本试剂盒提供了配制Tricine-SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制Tricine-SDS-PAGE胶。Tricine-SDS-PAGE胶可分离常规SDS-PAGE不易分离的小于10kD的蛋白及多肽，与市面其他Tricine胶相比，有电泳时间短，凝胶快等特点。本试剂盒约可配制30~50块常规大小的PAGE胶。

收到货后将整个试剂盒存放在2～8℃环境下冷藏保存，其中49.5%T 3%C、49.5%T 6%C和TEMED需2～8℃避光保存。APS配制成10%溶液(0.5g APS加5mL纯水)后，分装成小管-20℃保存，尽快使用完毕，通常半年内有效。

• APS配制成10%溶液后，应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。
  
• TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度，配制胶时TEMED最后加入。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 建议水压时，缓慢加入水珠，速度过快会使分离胶上层浓度不均，影响后续染色照相。
  
• 建议在4℃环境或常温冰浴下进行电泳实验，防止电流过大，造成温度升高，烧胶等现象。
  
• TEMED易燃，有腐蚀性，请注意防护。
  
• 过程中所加试剂量是针对80×60×1mm凝胶而定，若体积较大，可适当增加各溶液的体积。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩操作。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 根据样品的情况选择合适的胶浓度并按照下表中的配方配制分离胶。
  
• 将配制好的分离胶加到已经固定好的玻璃板间，等待其凝固。
  
• 待分离胶凝固后，按照下表中的配方配制浓缩胶，将配制好的浓缩胶加到已经固定好的玻璃板间，并插上梳子，等待其凝固。
  

  组分	分离胶			浓缩胶
  	20%/7mL	16.5%/7mL	15.5%/7mL	4%/2mL
  49.5%T 3%C	/	/	/	0.16mL
  49.5%T 6%C	2.83mL	2.33mL	2.17mL	/
  Gel Buffer	2.33mL	2.33mL	2.33mL	0.496mL
  Glycerol	0.75mL	0.75mL	0.75mL	/
  H2O	1.09mL	1.59mL	1.52mL	1.344mL
  10% APS	62μL	62μL	62μL	20μL
  TEMED	7.78μL	7.78μL	7.78μL	3μL

  
  
  
  
  • 按表格中配方，配制所需浓度的分离胶，水压凝结，待分离胶完全凝固后，倒出水，用吸水纸吸去残留的水后继续按配方配制浓缩胶，插上梳子，等待浓缩胶凝固。
    
  • 在电泳槽底部加入稀释10倍体积的阳极缓冲液，将制好的胶连同其装置放入电泳槽内，在两块胶之间的内槽内加入稀释10倍体积的阴极缓冲液，用30V的电压空胶预电泳10min，然后上样，建议Marker上样量为5～10μL，也可购买阴阳极电泳缓冲液套装，使用时无需稀释直接电泳，方便可靠。
    
  • 150V进行电泳实验，直至溴酚蓝抵达分离胶底部，取出凝胶进行染色照相。整个电泳过程在冰浴或4℃进行。
  
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