产品货号：
GS4775
中文名称：
SP Beadose FF离子交换色谱柱
英文名称：
SP Beadose 6FF IEC column
产品规格：
1mL|5mL|5×1mL|5×5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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CM Beadose FF琼脂糖，DEAE Beadose FF琼脂糖，Q Beadose FF琼脂糖和SP BeadoseFF琼脂糖是离子交换类型的纯化树脂，具有较好的流动性，高负荷性，高流通性以及强物理和化学稳定性。广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质核酸及多肽的分离纯化。本制品四种离子交换树脂均以高交联的6%琼脂糖为介质，可耐受较高的流速及更高的化学稳定性，适合实验室及工业大规模纯化。本制品适配各类中压色谱系统，如ÄKTA等。
| 树脂类型 | Q Beadose FF琼脂糖 | DEAE Beadose FF琼脂糖 | SP Beadose FF琼脂糖 | CM Beadose FF琼脂糖 |
| 产品编号 | GS4773 | GS4774 | GS4775 | GS4776 |
| 离子交换类型 | 强阴离子 | 弱阴离子 | 强阳离子 | 弱阳离子 |
| 总离子载量 | 0.18～0.25mmol(Cl-)/ml树脂 | 0.11～0.16mmol(Cl-)/ml树脂 | 0.18～0.25mmol(H-)/ml介质 | 0.09～0.13mmol(H-)/ml介质 |
| 电荷 | -N+(CH3)3 | -OCH2CH2N+(CH2CH3)2 | SO3- | -OCH2COO- |
| 结合能力 | 120mg人血清蛋白/ml树脂 | 110mg人血清蛋白/ml树脂 | 70mg核糖核酸酶/ml树脂 | 50mg核糖核酸酶/ml树脂 |
| 压力/流速 | 400~700cm/h,100kPa, 柱高15cm，内径5cm | 300~600cm/h,100kPa, 柱高15cm，内径5cm | 400~700cm/h,100 kPa, 柱高15cm，内径5cm | 300~600cm/h,100kPa, 柱高15cm，内径5cm |
| pH稳定性 | 2~14 (短期) 2~12 (长期) | 2~14(短期) 2~12(长期) | 3~14(短期) 4~12(长期) | 2~14(短期) 4~13(长期) |
| 基质 | 6%高度交联琼脂糖 | |||
| 化学稳定性 | 在常用溶液中稳定：8M尿素，6M盐酸胍，70%乙醇，1M氢氧化钠，1M乙酸钠。 | |||
| 储存缓冲液 | 20%乙醇(Q,DEAE,CM)，含0.2M醋酸钠的20%乙醇(SP) | |||
| 粒度范围 | 90μm(45～165μm) | |||
| 组分 | 1mL | 5mL | 5×1mL | 5×5mL |
| SP Beadose FF离子交换色谱柱 | 1mL | 5mL | 5×1mL | 5×5mL |
| 说明书 | 1份 | |||
保存：4～8℃，不可冻存
- Buffer的准备：
所用水和Buffer在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。 - 样品准备：
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。 - 样品纯化：
IEC预装柱是一种离子交换层析介质的预装柱产品，可以用各种常规的中低压色谱系统，以ÄKTA仪器使用为例介绍IEC预装柱使用方法：- 将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。
- 用3～5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。
- 使用至少5倍柱床体积的结合液平衡色谱柱。1mL预装柱推荐流速为1mL/min，5mL预装柱推荐流速为5mL/min。
- 利用泵或注射器上样。
注：样品的粘度增加使得即使上样体积很少，也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。 - 用洗杂液冲洗柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10～15个柱体积)。
- 用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液就足够了。梯度洗脱可以用20倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。
- 将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。
- SDS-PAGE检测：
将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。
离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱体积的缓冲液或去离子水进行平衡至离子强度或pH值稳定。
在位清洗：
离子交换树脂可以重复使用而无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
去除一些沉淀或变性物质，建议使用下面的方法：
用2倍柱体积的1M NaOH溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。
去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质：
用3～4倍柱体积的70%乙醇或3～4倍柱体积的1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。
去除一些离子键结合物质：
用3～4倍柱体积的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。
| 问题 | 原因分析 | 推荐解决方案 |
| 柱子反压过高 | 填料被堵塞 | 按照上述方法进行树脂清洗。 |
| 裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤，或者离心去除。 | ||
| 洗脱样品较杂 | 树脂重复多次使用 | 按照上述方法进行树脂清洗或更换新树脂 |
| 平衡不充分 | 增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂 |
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