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考马斯亮蓝R-250与考马斯亮蓝G-250相比，它的疏水性相对较弱，与蛋白质的结合速度相对较低。本试剂采用离子对方法，使得加快考马斯亮蓝R-250与蛋白质的结合速率，降低与凝胶的结合程度，因此大大减少了脱色的时间，同时也不需要固定，可以在1h左右完成，最低能够检测出10ng的蛋白条带。本试剂盒可以染10块小胶（6×8cm）。

• 实验前根据所染胶块的数量，取一定体积的染色液A和脱色液，用双蒸水稀释为一倍浓度后再使用。
  
• 本试剂盒所配的试剂量是针对80×60×1mm凝胶而定，若凝胶体积较大，可适当增加染色液的体积。
  
• 本试剂盒推荐的染色时间是针对100ng的蛋白而定的，若蛋白含量较少，可适当延长染色及脱色时间，如果蛋白含量少于40ng，应考虑过夜脱色，否则条带不宜观察。
  
• 染色液A和染色液B的混合应该即用即配，配好的溶液在1h后会产生沉淀，影响后面的染色过程。
  
• 盛装染色液的器皿容易产生蓝色的沉淀物，可以用1%的SDS浸泡洗刷去除。
  
• 实验时戴上一次性手套、口罩、护目镜并在通风橱下操作，因为染色液A和B有一定的腐蚀性，同时染色液与皮肤接触会产生稳定的复合物，很难清洗干净。
  
• 溶液B有点浑浊，是原料本身性质决定并不影响使用，最好在避光条件下保存。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 取出电泳后的聚丙烯酰胺凝胶，用双蒸水清洗振荡凝胶3次，每次5min。
  
• 加入20mL蒸馏水，置于摇床上振荡清洗5min，重复3次。
  
• 在干净的盛胶器中加入20mL已稀释一倍的染色液A和1.2mL染色液B充分混合，将胶放入器皿中，置于摇床上振荡染色30min。
  
• 将胶转移至另一个干净的器皿中用双蒸水冲洗凝胶，再加入20mL已稀释一倍的脱色液，置于摇床上，振荡清洗15min，重复3次。
  
• 待背景脱至无色后，即可进行蛋白条带的观察，照相和分析。