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OPD的全称为邻苯二胺(O-phenylenediamine)为无色物质，作为供氢体，在被氧化的情况下产生有棕色的产物，在450nm处有吸收峰。用酸终止酶反应后，在492nm处有最高吸收峰，呈现橘黄色，它灵敏度高，比色方便，产生的色彩比较稳定，不容易褪色。是HRP结合物最常用的底物，在酶联免疫中应用比较广泛。

• OPD本身微溶于水，但OPD与酸结合有助于溶解，与分析液A混合后可振荡10min左右完全溶解。曾有报道OPD有致异变性，操作时应注意做好防护。
  
• OPD见光易变质，与过氧化氢混合成底物应用液后更不稳定，在使用前20min内配制并避光直到使用完毕，OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行。使用终止液后，显色由棕色转向橙黄色。
  
• 请使用完后，将分析液A、分析液B和反应终止液的试剂瓶盖旋紧，以防止溶液挥发和与空气中的成分发生化学反应。
  同时反应终止液有一定的腐蚀性，应做好防护。
  
• 显色一般在室外温或37℃反应5～30min，再延长反应时间，可使本底值增高，影响实验结果的分析。
  
• 分析液A、分析液B和反应终止液在2～8℃的环境中避光保存。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等目的，由此产生的后果概不承担责任。

• 显色前，先取10mL分析液A移置一个15mL的干净棕色瓶中，再取25μL分析液B，加入其中并充分混匀。
  
• 在阴暗环境下分别向微孔中各加入100μL，避光显色5～30min，这时橙黄色的产物出现。
  
• 分别再向微孔中各加反应终止液50μL终止反应，酶标仪492nm读取光吸收值。