产品目录

本制品是一种亲和基质，用来分离与麦芽糖结合蛋白融合的目的蛋白，与MBP融合蛋白有高度特异性结合，可实现一步洗脱，方便快捷。适用于重力型过柱，MBP标签可通过Xa因子蛋白酶或TEV蛋白酶轻松去除。

每毫升柱床体积可结合>4mg MBP5-paramyosin sal融合蛋白。

组分	1mL	5mL
淀粉树脂	1mL	5mL
说明书	1份	1份

保存：2～8℃，切勿冻存，树脂保存在20%乙醇溶液中。


过柱缓冲液：20mM Tris-HCl(pH7.4)，0.2M NaCl。
注：
① 根据目的蛋白的稳定性可选择性添加：1mM EDTA，1mM DTT或10mM 2-巯基乙醇等。
② 可以尝试使用HEPES，MOPS和磷酸盐缓冲液(pH值从7.0~8.5)代替了柱缓冲液中的Tris-HCl，结果相似。
③ NaCl或KCl浓度在25mM至1M之间也与亲和纯化兼容。

• 取适量填料进行装柱，流净保护液，用5倍柱体积的过柱缓冲液洗涤平衡柱料以备用。
  
• 在4℃条件下，将可表达MBP5-paramyosin Sal融合蛋白的重组大肠杆菌中所得到的蛋白粗提取物，上样流经1mL的淀粉树脂柱。
  
• 用10倍柱体积的过柱缓冲液清洗柱子，收集未与柱料结合的杂蛋白以便后续电泳分析。
  
• 后再向过柱缓冲液中加入10mM的麦芽糖混匀后洗脱目的蛋白，在4～20%的SDS-PAGE电泳胶上检测，理论应显示一个条带则是所需的目的蛋白。

装柱的树脂可以用以下步骤进行再生：

成分	用量
水	3倍柱体积
0.1%SDS	3倍柱体积
水	1倍柱体积
过柱缓冲液	5倍柱体积

建议最大线性流速：24cm/h
直径1.6cm柱子：0.8mL/min
直径2.5cm柱子：2.0mL/min
线性流速(cm/h)πr²=体积流速mL/h

• 每次使用前要用5倍体积的过柱缓冲液冲洗平衡柱子。
  
• 尽管树脂柱需要在4℃下过洗，但是0.1%的SDS在这个温度将会形成沉淀，因此建议用前将SDS溶液储存在室温。本品可进行多至5次以上的再生程序。

相关搜索：淀粉树脂，直链淀粉琼脂糖珠，MBP蛋白纯化基质，麦芽糖结合蛋白纯化树脂，淀粉介质，Amylose Resin