产品货号:
GS1466
中文名称:
重力型去盐柱
英文名称:
Sephadex DeSalting Gravity Column
产品规格:
10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是从Sephadex G-25 Resin(细)介质溶胀而得,具有分辨率高,流速适中,易收集等特点,是从小分子的盐或其他缓冲体系中分离分子量大于5000 Da的蛋白质分子,而这些大于5000 Da的生物分子只能够被排阻在由铰链葡聚糖颗粒之间的间隙中,这种即用型Sephadex脱盐柱也可用于将含有大于5000 Da的生物分子的缓冲溶液替换成另外一种所需要的缓冲溶液,这些铰链葡聚糖具有良好的色谱特性,硬度和流速在有机溶剂、碱、弱酸和盐等溶液中具有良好的稳定性,能够被灭菌处理,甚至在中性溶液中120℃加热30min,也不会影响其色谱特性。整个实验过程不会超过1h,当所用的缓冲溶液不会造成蛋白质与分离介质产生非特异性吸附的情况下,蛋白质的回收效率在90%以上。
组分 | 规格 |
重力型去盐柱 | 10mL |
说明书 | 1份 |
保存:2~8℃,不可冻存,有效期3年。
总的柱体积 | 10mL |
推荐的每次上样样品体积 | 0.25~0.3mL |
葡聚糖胶体积 | 2.5mL |
葡聚糖胶颗粒间隙体积(约~1/3胶体积) | 0.9mL |
葡聚糖胶排阻极限(相对于免疫球蛋白) | 5000 Da |
葡聚糖胶颗粒直径 | 25~125μm |
- 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算,为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能,将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
- 本制品只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
- 移去即用型Sephadex重力脱盐柱(以下简化为“脱盐柱”)的上盖,倾倒出含有保护试剂的保护液。
- 再移去脱盐柱的下盖,将脱盐柱垂直固定在铁架上,将脱盐柱的流出口伸入到合适的容器中,先用6~7mL的双蒸水或所要替换成的缓冲液将脱盐柱平衡三次,待柱中的双蒸水或缓冲液基本流干。
- 将脱盐柱的流出口伸入到一支1.5~2mL收集管中,将0.2~0.3mL所要脱盐的或所要替换的蛋白质样品溶液加入到凝胶上方的聚丙烯滤膜片的中央。
- 让蛋白质样品溶液进入到胶体中,当蛋白质样品溶液完全进入到胶体中时,脱盐柱中液体将停止流出,而这时可以收集到与所加样品溶液同样体积的平衡液。
- 将脱盐柱的流出口伸入到另外一个1.5~2mL收集管中,加入0.5~1mL双蒸水或所要替换成的缓冲液.。
- 让双蒸水或所要替换成的缓冲液进入到胶体中,收集从流出口流出的溶液。
- 重复步骤5~6次,直到所收集的流出液中含有所需要的蛋白质。
注:可用280nm吸收波长来检测,通常在第一或第二管中出现目的蛋白,而小于排阻极限的盐或其它小分子将出现在紧随其后的其它管中。 - 脱盐柱的再生:用10倍胶体积的1X PBS或1X TBS溶液冲洗葡聚糖胶,再用5倍胶体积的含有0.05%叠氮化钠双蒸水冲洗葡聚糖胶,再加入适量体积的含有0.05%叠氮化钠双蒸水,盖上下盖,使得凝胶上方含有3mL左右含有0.05%叠氮化钠双蒸水,再盖上上盖,将再生的脱盐柱2~8℃保存,不可冻存。
注:可将0.05%叠氮化钠更换成0.1% Proclin-300抑菌剂或无需添加叠氮化钠,保存液用20%乙醇保存即可。
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