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由于血清中的血清白蛋白和抗体的含量占血清总蛋白的70%以上，这些蛋白质的存在会严重影响血清蛋白质组学的研究，因此去除血清中的白蛋白和抗体是血清蛋白质组学研究的重要前提，本产品主要用于从血清，血浆，脊液中去除人血清白蛋白（HAS）和IgG抗体，高效的混合树脂可以去除90%以上的血清白蛋白和抗体，一次性的微型离心管过滤式操作使得整个操作过程更加简单快捷，整个操作过程可以在40min内完成，处理过的样品可以用于Western blot，2D electrophoresis，Massspectrometry等实验，该试剂盒可以使用25次，每次可以处理10μL的血清样品。

• 本试剂盒适用于人，猴，猪，兔等的血清，血浆，脊液等样品。
  
• 每340μL树脂可以结合10μL血清中大约600μg的血清白蛋白和IgG，但是由于不同样品中含有血清白蛋白和IgG抗体含量差别较大，可以根据需要调整树脂与血清样品的比例，以便得到更好的血清白蛋白和IgG抗体去除效果。
  
• 血清白蛋白和IgG抗体与树脂的结合的pH范围在6.0~9.0。同时样品中应该不能含有较多的盐份，如果样品的NaCl≥500mM，请事先对样品进行透析或脱盐，替换为含盐量较低的缓冲液，如果样品中含有其它干扰血清白蛋白和IgG抗体与树脂的结合的物质，也必须先对样品进行透析或脱盐。
  
• 在结合/洗涤液中加入终浓度为0.01%的Tween-20或其它类似的去污剂，可以减少非特异性结合，但是会减少血清白蛋白的结合，有时会影响下游的应用。
  
• 本试剂盒只提供25支2mL的收集管，多出部分的需要自备，可以选用EP管，锥底管，离心管等。
  
• 样品太多或温育时间太短，又或着在温育的过程中样品与树脂没有充分混合，都会导致血清白蛋白和IgG抗体的去除效率降低。
  
• 步骤B-7中得到的滤液可以使用超滤管，进行浓缩和脱盐。如果是用来做2D电泳，也可以直接用TCA/丙酮沉淀，再用丙酮洗涤两次，取沉淀，再用2D电泳样品提取液(GS1438)溶解后，再用于2D电泳。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 树脂制备
  
  • 取一个离心柱套入一个2mL的收集管中。
    
  • 将盛装树脂的试剂瓶上下颠倒，混匀使之形成均一的悬浮液，取340μL的悬液加入到离心柱中。
    
  • 7500rpm（10000g）离心1min，将收集管中的液体倒掉，再将含有树脂的离心柱重新套入收集管中。
    
  • 加入300μL的结合/洗涤液到离心柱中，盖上盖子，上下颠倒3～5次或涡悬振荡10sec，再7500rpm（10000g）离心1min，将收集管中的液体倒掉，重复该步骤2～3次，直到流出的液体基本接近无色。
• 样品处理
  
  • 取一支干净的离心管，将10μL的血清样品加入到预冷的200μL结合/洗涤液中混匀。
    
  • 将以上的混合液加入到含有树脂的离心柱中，盖上盖子，上下颠倒3～5次或涡悬振荡10sec。
    
  • 在4℃摇床上中速振荡15min或涡悬振荡15min。
    
  • 再转置冷冻离心机，4℃，7500rpm（10000g）离心1min，收集滤液。
    
  • 将收集管中的滤液重新转移到含有树脂的离心柱中，在摇床上4℃中速振荡15min或涡悬振荡10～15min。
    
  • 转置冷冻离心机，4℃，7500rpm（10000g）离心1min，加入预冷的200μL的结合/洗涤液到含有树脂的离心柱中。
    
  • 4℃，7500rpm（10000g）离心1min，此时在收集管中含有约400μL的滤液，此滤液是去除了血清白蛋白和IgG抗体的样品，此样品可以进一步脱盐和浓缩或4℃保存待用。
• 洗脱方案选择
  
  • 含有树脂的离心柱套入一个新的2mL的收集管中（用户自备，可以选用EP管，锥底管，离心管等），加入预冷的200μL结合/洗涤液到含有树脂的离心柱中，盖上盖子，上下颠倒3～5次，再转置冷冻离心机4℃，7500rpm（10000g）离心1min，将收集管中的液体倒掉。
    
  • 含有树脂的离心柱套入另一个新的2mL的收集管中（用户自备，可以选用EP管，锥底管，离心管等），根据下游实验的需要加入200μL以下洗脱液。
    注意：
    ① 1D SDS-PAGE：1倍浓度的不含有还原试剂的SDS Sample Buffer，例如(50mM Tris-HCL pH6.8、10% glycerol、2% SDS)。
    ② 2D Electrophoresis：1倍浓度的不含有还原试剂的2D Electrophoresis Sample Buffer，例如(5M Urea、4%Chaps、2M Thiourea)。
    ③ 在进行洗脱时，不要加入含有DTT，TCEP等还原试剂的洗脱液，否则会破坏树脂，导致树脂上共价连接的物质的释放。
    
  • 再4℃，7500rpm（10000g）离心1min，收集含有血清白蛋白和IgG抗体的滤液或者4℃保存待用。