产品货号:
ALH381
中文名称:
考马斯亮蓝快速染色液
英文名称:
Coomassie Brilliant Blue Rapid Staining Solution
产品规格:
500ml|2L
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品采用独特的考马斯亮兰G250染色液配方,它是基于一种最新的热增强型胶体考马斯亮兰染色技术研制而成,允许在加热的状态下促进胶体考马斯亮兰迅速的渗入蛋白凝胶,并选择性的结合蛋白条带,因此不需要脱色就可以直接观察。
- 快速,15~20分钟立刻可以观察。
- 环保染料,完全不含有各种醋酸,甲醇等有毒有刺激性成份。
- 敏感度高于传统的考马斯亮兰染色法一倍左右。
组分 | 500mL | 2L |
考马斯亮蓝快速染色液 | 500mL | 2L |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。
- 用户需要自备微波炉和微波炉用塑料容器,没有微波炉的也可以使用任何加热装置(比如heat block,电炉)以及配套的可以平放需要染色胶大小的烧杯或者金属托盘,当然加热时间需要根据具体情况调节。
- 实验涉及到加热过程,小心被热水灼伤。
- 染色液是以50毫升做一次为标准用量,可以根据容器的大小适当调整用量。
- 加热和煮沸时间并不特别严格,都应该根据染色效果调整。
以0.75~1毫米厚4~20%的mini-PAGE胶举例。
- 电泳后将胶用双蒸水或者去离子水(以下称呼用水代替)漂洗15秒钟,直接将PAGE胶放置于一个微波炉塑料容器或者其它可以用于微波炉的容器,倒入150毫升水(或者根据容器大小加入足够量)后用最大火力加热至沸腾5~10秒后,熄火放置5分钟,中间用手轻摇数次或者置脱色摇床上轻摇。
- 可选步骤:弃去水,换新的水后重复步骤1一次。
- 倒干水后,将胶浸入50毫升染色液或者根据容器大小加入足够量(使用前颠倒摇匀染色液)用最大火力加热至沸腾10~15秒后,熄火放置5分钟,中间用手轻摇数次或者置脱色摇床上轻摇。
- 弃去染色液,用水漂洗几遍,即可观察条带。
- 可选步骤:将胶浸入50毫升水后用最大火力加热至煮沸10~15秒后,熄火放置5分钟,中间用手轻摇数次或者置摇床上轻摇脱色后观察。
- 没有见到条带或者条带微弱
- 样品蛋白浓度太低,检测样品蛋白浓度。
- 胶比较厚,如1.5毫米厚,或者蛋白浓度低,应该恰当增加步骤1水处理从2次到4次和染色时间延长或者不更换染色液的情况下重复步骤3一次,注意这样同时会显著加深背景染色,应该配合加上下面描述的脱色步骤。
- 样品蛋白浓度太低,检测样品蛋白浓度。
- 背景过高
背景过高会掩盖条带,降低敏感度,可以适当减少水加热处理次数或者缩短加热染色时间。对于已经背景染色过高的胶,可以将胶水漂洗后浸入适量水(10%的醋酸脱色效果更快),微波炉加热至沸腾后10秒,熄火放置5分钟脱色,如果效果不满意还可以重复脱色一次。加上脱色步骤不仅可以减低背景,还可以适度提高敏感度。如果时间充裕,可以加入250毫升水,摇床上轻摇脱色,每30分钟更换一次,重复3次或者脱色到满意为止。
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