产品货号:
SY0585
中文名称:
细胞膜红色荧光探针(DiD)
英文名称:
DiD Perchlorate
产品规格:
25mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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DiD是DiI的衍生物,具有明显往红光迁移的激发和发射光谱,这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。DiD可被633nm的氦-氖(He-Ne)激光所激发,呈红色荧光,在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,进入细胞后,染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞染色。
DiI、DiO、DiD和DiR是一系列亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构,这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。这类染料具有很高的摩尔消光系数,极性依赖性的荧光和很短的激发寿命。
英文别名 | DiIC18(5);1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate |
分子式 | C61H99ClN2O4 |
分子量 | 959.91 |
光谱特性 | Ex/Em=644nm/663nm |
推荐滤光器 | XF47-Omega,31023-Chroma |
外观 | 红色或紫色或深蓝色固体 |
纯度 | >97%(TLC) |
溶解性 | 溶于DMF,DMSO,乙醇 |
结构式 |
组分 | 规格 |
细胞膜红色荧光探针(DiD) | 25mg |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,干燥避光,有效期2年。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
- 本制品仅作科研用途!
- 染色液制备
- 配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。
注:- 未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,可稳定保存6个月。
- 发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
- 未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,可稳定保存6个月。
- 工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5μM的工作液。
注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化
- 配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。
- 悬浮细胞染色
- 加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
- 37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
- 孵育结束,按1000~1500rpm离心5min。
- 倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
- 重复3和4步骤两次以上。
- 加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
- 贴壁细胞的染色
- 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
- 从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
- 在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
- 37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
- 吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
- 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
- 显微镜检测
- DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见下表。
产品名称 货号 分子量 Ex/Em 推荐滤光器 DiO SY0560 881.7 484/501nm XF23-Omega,31001-Chroma DiI SY0494 933.87 550/567nm XF32-Omega,31002-Chroma DiD SY0585 959.91 644/663nm XF47-Omega,31023-Chroma DiR SY0584 1013.4 748/780nm XF112-Omega,41009-Chroma - 多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
- DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
- DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
- DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005。
- DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
- DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见下表。
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