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本制品为来源于兔的抗甲胎蛋白(AFP)的多克隆抗体，配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。


名称：AFP Rabbit Polyclonal Antibody
类别：多克隆抗体；一抗
免疫原：一种合成肽(KLH偶联)，与人AFP的C末端残基相对应
宿主：Rabbit
抗体类型：IgG
纯化方法：肽亲和纯化
交叉反应性：人


建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：

推荐应用	WB	IF	IHC	ICC	FC
稀释比例	1:1000～1:2000	1:200	1:200	1:200	1:100～1:200

组分	规格
兔抗AFP抗体	50μL
Western一抗稀释液	50mL

保存：抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，有效期一年。

• Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
  
• 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5～10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
  
• 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1～3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
  
• 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。

• Western检测：
  
  • 按照推荐的稀释比例用百奥莱博提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
    
  • 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时，确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
    
  • 回收稀释的一抗，4℃保存以备下次继续使用。
    
  • 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页：
    Western实验步骤及试剂
• 免疫染色：
  可以使用免疫染色一抗稀释液(货号：YT088)稀释抗体，使用后注意回收稀释好的一抗，具体操作可以参考如下网页：免疫染色的方法与步骤
  
• 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
  
• 代表性图片：
  

  Fig.1.Western blot analysis of AFP on different cell lysates using anti-AFP antibody at 1/1000 dilution.Positive control:Lane1:HepG2 Lane2:human lung Lane 3:human liver.	Fig.2.Immunohistochemistrystaining of AFP in HepG2 cells (green).Cells were fixed in paraformaldehyde permeabilised with 0.25% Triton X-100/PBS.
  Fig.3.Immunohistochemical analysis of paraffin- embeddedhuman liver cancer tissue using anti-AFP antibody.Counter stained with hematoxylin.	Fig.4.Flow cytometric analysis of Jurkat cells with AFP antibody at 1/100 dilution (blue) compared with an unlabelled control (cells without incubation with primary antibody;red).Goat anti rabbit IgG (FITC) was used as the secondary antibody.

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