产品货号:
BM0355
中文名称:
Taq聚合酶抗体
英文名称:
Taq antibody
产品规格:
200U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是Taq DNA polymerase的鼠源单克隆抗体,与Taq DNA polymerase结合后能够有效封闭DNA聚合酶活性。本制品与Taq DNA polymerase的亲和力非常高,在55℃下仍然可以封闭95%以上Taq DNA polymerase的聚合酶活性,因此可以非常有效地抑制常温下引物非特异性退火及引物二聚体所引起的非特异性扩增。
本制品只需要在95℃加热30sec即可与Taq DNA polymerase不可逆解离,释放聚合酶活性。本品适用于各种基于Taq DNA polymerase的热启动PCR、定量PCR反应等。
将Taq antibody与Taq DNA Polymerase混合,37℃孵育3h后,在50℃,1h条件下抑制95%以上的1U Taq DNA Polymerase聚合酶所需的Taq antibody量定义为1U。
组分 | 规格 |
Taq antibody(5U/μL) | 40μL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃
蛋白纯度检测:经SDS-PAGE电泳检测,蛋白纯度不低于90%。
- 活性封闭检测:将经Taq antibody封闭的Taq DNA Polymerase在50℃孵育4h后检测聚合酶活性,活性释放<5%。
- 热启动检测:将经Taq antibody封闭的Taq DNA Polymerase在95℃孵育30 s后检测聚合酶活性,活性释放≥95%。
- 核酸内切酶活性检测:将5U Taq antibody与200ng超螺旋质粒DNA在37℃下,共同温育4h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。
- 非特异性核酸酶活性检测:将5U Taq antibody与15ng双链DNA片段在37℃温育16h,使用琼脂糖凝胶电泳检测检测双链DNA底物无变化。
- 宿主DNA残留检测:使用鼠特异性引物探针组,采用荧光定量PCR法检测5U Taq antibody,宿主基因组DNA残留低于1 copy。
将Taq DNA聚合酶(货号:BM0352)和Taq antibody(5U/μL)等体积混合后,37℃孵育3h,即为热启动型Taq DNA Polymerase(2.5U/μL)。也可按如下步骤确定最佳孵育比例:
- 选择一对或多对单独扩增时易产生非特异性扩增的引物;
- 依据下表配制Taq antibody与Taq DNA聚合酶孵育体系(可依据需求进行调整):
反应比例 2:1 1:1 1:2 1:4 1:8 1:10 Taq antibody(5U/μL) 1μL 1μL 1μL 1μL 1μL 1μL Taq DNA聚合酶 0.5μL 1μL 2μL 4μL 8μL 10μL - 37℃孵育3h;
- 配制PCR反应体系,反应后进行凝胶电泳分析,根据是否产生非特异扩增条带判断最适孵育比例。
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