产品货号：
KM0153
中文名称：
细胞膜荧光探针(DiA)
英文名称：
4-(4-(Dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridinium iodide
产品规格：
25mg
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品以DiA的碘盐形式提供，适用于荧光检测研究。
DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料（dialkylaminostyryl dye），扩散进入细胞膜（比DiO扩散速度快），常用于神经元的示踪。最显著的特点就是能与DiI（DiIC18(3)）联合使用进行双色标记。DiA能用于甲醛固定组织染色，研究发现某些情况下当DiO不能标记固定组织时，DiA可得到良好标记。DiA水溶液中的荧光非常弱，但与磷脂双层膜结合后，光谱迁移荧光明显加强。因其发射光谱非常广，可被绿色，橙色，甚至是红色滤片检测到。
分子式：C46H79IN2
分子量：787.04g/mol
外观：红色或橙色固体
纯度：≥90%
Ex/Em：490/611nm（甲醇）
溶解性：溶于乙醇，DMSO，甲醇
推荐滤光器：Omega-XF21,Chroma-31024
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，有效期一年。
一、工作液制备
储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5mM的储存液。例如，取25mgDiA（Mw：787.04g/mol）溶于6.35mL无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。
注意：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。
工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5μM的工作浓度。
注意：工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
二、悬浮细胞染色
1．加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2．37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
3．孵育结束，按1000～1500rpm离心5min。
4．去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5．再重复3，4步骤两次。
三、贴壁细胞染色
1．将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2．从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。
3．在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4．37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
5．吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。
相关搜索：细胞膜荧光探针(DiA)，4-Di-16-ASP
DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料（dialkylaminostyryl dye），扩散进入细胞膜（比DiO扩散速度快），常用于神经元的示踪。最显著的特点就是能与DiI（DiIC18(3)）联合使用进行双色标记。DiA能用于甲醛固定组织染色，研究发现某些情况下当DiO不能标记固定组织时，DiA可得到良好标记。DiA水溶液中的荧光非常弱，但与磷脂双层膜结合后，光谱迁移荧光明显加强。因其发射光谱非常广，可被绿色，橙色，甚至是红色滤片检测到。
分子式：C46H79IN2
分子量：787.04g/mol
外观：红色或橙色固体
纯度：≥90%
Ex/Em：490/611nm（甲醇）
溶解性：溶于乙醇，DMSO，甲醇
推荐滤光器：Omega-XF21,Chroma-31024
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，有效期一年。
一、工作液制备
储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5mM的储存液。例如，取25mgDiA（Mw：787.04g/mol）溶于6.35mL无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。
注意：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。
工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5μM的工作浓度。
注意：工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
二、悬浮细胞染色
1．加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2．37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
3．孵育结束，按1000～1500rpm离心5min。
4．去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5．再重复3，4步骤两次。
三、贴壁细胞染色
1．将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2．从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。
3．在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4．37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
5．吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。
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