产品货号：
KM0103
中文名称：
过氧化氢荧光探针
英文名称：
H2O2 fluorescent probe
产品规格：
1mg
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本探针本身无荧光，可见光区域内无吸收峰。一旦接触H2O2，瞬间激发荧光增加并伴随可见波长吸收带的生成（Ex/Em=490/514nm）。因其二元的吸收/发射荧光反应，此探针具有较大的动力学范围。与相似的ROS比如O2-，NO，或OCl-相比，本探针对H2O2呈现出100倍以上的选择性。
注意事项：
1．本品的DMSO储存液需分装成单次用量后，-20oC避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。
2．整个操作过程中注意避光。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
1、储存液制备
将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入适量无水DMSO充分溶解配成2~5mM储存液（比如，1mg本探针（Mw:~600）加入333μlDMSO，充分溶解混匀后即得到5mM储存液）。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。
2、工作液准备
正式实验前，或取粉末按照储存液制备用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。
2.1对于溶液H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备2×工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液（pH 7.0）稀释储存液。工作液现配现用。建议使用5μM终浓度的探针，测定溶液体系中H2O2浓度。
2.2对于细胞H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS，pH 7.0或PBS稀释储存液。工作液现配现用。
3、上清液H2O2测定
以下为溶液H2O2测定的推荐步骤，仅作参考，请根据具体需求做优化调整。
3.1于96孔板，加50μl 2×探针工作液到每个孔（H2O2标准、空白对照、待测样本）内使总的测定体积为100μl/孔。
注意：对于384孔板，加25μl样品和25μl 2×探针工作液，使得测定体积为50μl/孔。
3.2室温避光孵育反应体系15~60min。
3.3荧光酶标板内监测用荧光增强，Ex/Em=490/525nm。
3.4空白孔（只含有反应缓冲液）的荧光用作对照，其他孔的荧光值需减掉空白对照孔荧光。
4、活细胞H2O2测定
本探针能主动扩散进入活细胞，且能反映胞内H2O2微摩尔浓度变化。以下是推荐的活细胞H2O2显微成像检测步骤，仅作参考，可根据具体需求优化调整。
4.1按照步骤2.2配制1×探针工作液。工作液现配现用。
4.2按照实验要求处理细胞。
4.3用1×探针工作液避光孵育细胞5~60min或适合自身需求的时间。用PBS清洗细胞2次。
4.3用荧光酶标板（底部读数模式）监测荧光增强，Ex/Em=490/525nm。或者用荧光显微镜的FITC通道成像检测荧光增强。
保存：-20oC避光干燥保存，至少1年有效。
相关搜索：过氧化氢荧光探针，H2O2 fluorescent probe
注意事项：
1．本品的DMSO储存液需分装成单次用量后，-20oC避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。
2．整个操作过程中注意避光。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
1、储存液制备
将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入适量无水DMSO充分溶解配成2~5mM储存液（比如，1mg本探针（Mw:~600）加入333μlDMSO，充分溶解混匀后即得到5mM储存液）。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。
2、工作液准备
正式实验前，或取粉末按照储存液制备用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。
2.1对于溶液H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备2×工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液（pH 7.0）稀释储存液。工作液现配现用。建议使用5μM终浓度的探针，测定溶液体系中H2O2浓度。
2.2对于细胞H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS，pH 7.0或PBS稀释储存液。工作液现配现用。
3、上清液H2O2测定
以下为溶液H2O2测定的推荐步骤，仅作参考，请根据具体需求做优化调整。
3.1于96孔板，加50μl 2×探针工作液到每个孔（H2O2标准、空白对照、待测样本）内使总的测定体积为100μl/孔。
注意：对于384孔板，加25μl样品和25μl 2×探针工作液，使得测定体积为50μl/孔。
3.2室温避光孵育反应体系15~60min。
3.3荧光酶标板内监测用荧光增强，Ex/Em=490/525nm。
3.4空白孔（只含有反应缓冲液）的荧光用作对照，其他孔的荧光值需减掉空白对照孔荧光。
4、活细胞H2O2测定
本探针能主动扩散进入活细胞，且能反映胞内H2O2微摩尔浓度变化。以下是推荐的活细胞H2O2显微成像检测步骤，仅作参考，可根据具体需求优化调整。
4.1按照步骤2.2配制1×探针工作液。工作液现配现用。
4.2按照实验要求处理细胞。
4.3用1×探针工作液避光孵育细胞5~60min或适合自身需求的时间。用PBS清洗细胞2次。
4.3用荧光酶标板（底部读数模式）监测荧光增强，Ex/Em=490/525nm。或者用荧光显微镜的FITC通道成像检测荧光增强。
保存：-20oC避光干燥保存，至少1年有效。
相关搜索：过氧化氢荧光探针，H2O2 fluorescent probe