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内质网红色荧光探针(活细胞成像用)图片
产品货号:
KM0047
中文名称:
内质网红色荧光探针(活细胞成像用)
英文名称:
ER-Tracker Red
产品规格:
20μL|5×20μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本品为ER-Tracker Red的DMSO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度约为1μM,需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作,活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物,即BODIPY TR标记的格列苯脲(BODIPY TR Glibenclamide)。格列本脲,又名优降糖(Glyburide),是一种磺酰脲类口服降糖药,用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌,以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道(KATP)的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY TR,最大激发/发射波长~587/615nm,光谱特性类似于传统的Texas Red,与检测该染料的标准滤片兼容。

主要参数:
分子式:C44H42BClF2N6O7S2
分子量:915.2316
外观:液体
Ex/Em:587/615nm(in methanol)
检测滤片:TRITC
保存:≤-20oC避光干燥保存,至少6个月有效。

注意事项:
1.整个染色过程中需注意避光。
2.ER-Tracker Red(1mM)在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法:
以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

一、试剂准备
ER-Tracker Red以1mM的DMSO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Red从冰箱内取出,确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解,经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装,≤-20oC避光干燥保存。

二、细胞染色
1.制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度,建议工作浓度~1μM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。
注意:在含Ca2+/Mg2+的Hank’s平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg,Cat# KM0185~500ML)内进行染色可得到最佳结果。
2.细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15~30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤三。

三、细胞固定
1.固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。
2.清洗和观察细胞:固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理,因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。
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