产品货号:
KM0006
中文名称:
镁离子荧光探针(Mag-Fluo-4 AM)
英文名称:
Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester,cell permeant
产品规格:
2×50μg|10×50μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM(货号:KM0172-50UG)的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22μM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。
镁离子指示探针
Mag-Fluo-4具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小,这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样,Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与Mg2+结合后,呈明显的荧光加强,但无光谱迁移(见下图)。
Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱
钙离子指示探针
Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物,具有更低钙离子结合亲和性,特别适合用于检测1μM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。
分子式:C37H33F2NO18
分子量:817.65g/mol
外观:橙色固体
纯度:≥90%
Ex/Em:494/516nm
溶解性:溶于DMSO
保存:-20oC干燥避光保存,至少一年有效。
使用方法:
一、储存液制备
取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DMSO配制成1~5mM储存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μlDMSO,充分溶解后,即得到5mM储存液。
注意:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。尽快使用完。
二、操作步骤
注意:以下使用方法仅作参考,需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。加载温度范围是RT~37℃,更高温度会提高加载速度,但更低温度能最小化染料的内在化现象。表面活性剂Pluronic F-127有时加入能促进AM探针在水溶性缓冲液内的均匀分散。
1.在所需温度(25℃~37℃)预孵育细胞10min,使其离子梯度达到稳定和平衡。
2.取4μl Mag-Fluo-4 AM储存液和5μl 20%Pluronic F-127,加入1ml细胞培养液,剧烈漩涡混匀得到均匀的探针分散液。
3.取250μl上述制备的探针分散液加入750μl含细胞的培养基内,混匀,此时得到终浓度为1~5μM的工作液,根据起始母液浓度来确定。
4.根据需求探针孵育15~60min。
5.细胞清洗3次,之后继续孵育30min以保证细胞内的探针完全去酯化。之后选择合适的仪器,进行荧光测定。
相关搜索:镁离子荧光探针(Mag-Fluo-4 AM),低亲和性钙离子荧光探针,Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester,cell permeant
镁离子指示探针
Mag-Fluo-4具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小,这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样,Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与Mg2+结合后,呈明显的荧光加强,但无光谱迁移(见下图)。
Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱
钙离子指示探针
Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物,具有更低钙离子结合亲和性,特别适合用于检测1μM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。
分子式:C37H33F2NO18
分子量:817.65g/mol
外观:橙色固体
纯度:≥90%
Ex/Em:494/516nm
溶解性:溶于DMSO
保存:-20oC干燥避光保存,至少一年有效。
使用方法:
一、储存液制备
取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DMSO配制成1~5mM储存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μlDMSO,充分溶解后,即得到5mM储存液。
注意:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。尽快使用完。
二、操作步骤
注意:以下使用方法仅作参考,需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。加载温度范围是RT~37℃,更高温度会提高加载速度,但更低温度能最小化染料的内在化现象。表面活性剂Pluronic F-127有时加入能促进AM探针在水溶性缓冲液内的均匀分散。
1.在所需温度(25℃~37℃)预孵育细胞10min,使其离子梯度达到稳定和平衡。
2.取4μl Mag-Fluo-4 AM储存液和5μl 20%Pluronic F-127,加入1ml细胞培养液,剧烈漩涡混匀得到均匀的探针分散液。
3.取250μl上述制备的探针分散液加入750μl含细胞的培养基内,混匀,此时得到终浓度为1~5μM的工作液,根据起始母液浓度来确定。
4.根据需求探针孵育15~60min。
5.细胞清洗3次,之后继续孵育30min以保证细胞内的探针完全去酯化。之后选择合适的仪器,进行荧光测定。
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