产品货号:
GS2034
中文名称:
4S GelRed核酸染料(10000×)
英文名称:
4S GelRed, 10000X in water
产品规格:
100μL|500μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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4S GelRed核酸染料是一种灵敏度高、稳定性高、安全性高的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中),能与DNA静电结合。与EB相比,4S GelRed不能透过细胞膜而进入细胞内。Ames测试法显示,该染色剂的诱变性远远小于EB。4S GelRed与EB有相同的光谱特性,可用和观察EB染色相同的普通紫外凝胶透射仪观察。
- 无毒性:无法穿透细胞膜而进入细胞。
- 高灵敏性:灵敏度高,对核酸的迁移影响小于SYBR Green I。
- 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
- 操作简单:无需脱色或冲洗。
- 适用性强:可选择凝胶染色法和泡染法;适用于琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。
- 使用方便:与EB的使用方法相似,无需更换Buffer及检测设备。
组分 | 100μL | 500μL |
4S GelRed核酸染料(10000×) | 100μL | 500μL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:RT
- 推荐使用1X TBE,因含硼酸盐的试剂导电性能更好;
- 电泳时电压不宜过高,一般TBE不超过120V,TAE不超过100V。
- 由于产品性质稳定,为避免产生沉淀,该染料无需冷藏,请于室温下储存;若出现沉淀,请将染料加热至45~50℃,2min,并搅拌溶解,此方法不影响使用效果。
- 4S GelRed虽然无毒无致癌性,但对皮肤和眼睛仍有少量的刺激作用,因此,实验过程中请戴手套和口罩操作。
- 胶染法(前染,方法同EB)
- 制备琼脂糖凝胶溶液,加热溶解;
- 加入4S GelRed核酸染料(10000X水溶液),例如每50mL琼脂糖凝胶溶液中加入5μL 4S GelRed,以此比例类推;由于4S GelRed具有良好的热稳定性,故可在热的琼脂糖溶液中直接添加;
- 摇晃、震荡或翻转保证染色剂充分混合,铺胶;
- 电泳并用紫外投射仪观察结果。
注意:
① 鉴于4S GelRed的高灵敏性,建议减少DNA上样量。推荐已知浓度的样品,上样量为50~200ng/泳道。对于未知浓度的样品,尝试1/2或1/3的常用上样量。若实验需要酶切或大浓度的上样量,如胶回收实验,推荐使用泡染法。
② 如果总看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关。请尝试:- 降低琼脂糖浓度;
- 选用更长的凝胶;
- 延长凝胶时间以保证边缘清晰;
- 改进上样技巧或选择泡染法染色。
- 降低琼脂糖浓度;
- 制备琼脂糖凝胶溶液,加热溶解;
- 泡染法(后染)
- 常规方法电泳
- 制备3X染色液:用水将染色剂稀释3,300倍到0.1M NaCl中。
例如:将15μL 4S GelRed和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中。 - 将3X染色液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染色剂避光。室温振荡染色30min,染色时间因凝胶浓度和厚度而定,对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意:
① 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
② 3X染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
- 常规方法电泳
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