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黑色素脂褐素染色液(Schmorl法)的染色原理是黑色素和脂褐素均有强大的还原性，可将高铁离子还原为亚铁离子，再与铁氰化钾反应而呈暗蓝色，本法可显示任何能还原高铁化物的物质，因此对黑色素和脂褐素的显示不是特异性的，可根据组织和细胞的不同，色素的位置和分布情况以及着色深浅，对鉴别可有一定的帮助，亦可与氨银法、醛品红法、高碘酸无色品红法等进行比较观察。

脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成，被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的，氧化过程是缓慢的、逐步发生的，因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色，形状和大小也变化不一，可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细胞等，多分布在细胞核周围。脂褐素又可分为早期脂褐素和晚期脂褐素，早期脂褐素有脂质的所有特征，用苏丹黑B法可染成灰黑色；晚期脂褐素是经完全氧化后的色素，失去了嗜苏丹性，但有更大的还原力，主要用Schmorl高铁-铁氰化物还原法来显示；目前常用的脂褐素染色法有PAS法、Schmorl高铁-铁氰化物还原法、Gomori醛复红法等。黑色素属于非血源性内生色素，是一组颜色从浅棕色到黑色的色素，这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质和毛囊中，是一种十分稳定的物质，既不溶于有机溶剂，也不溶于水；可摄取亚铁离子形成黑色素亚铁复合物，再与铁氰化钾作用成蓝色；可把氨银溶液还原为金属银；可被高锰酸钾等强氧化剂漂白。许多方法可用于识别黑色素和黑色素生成细胞，其中最可靠的有：还原方法，如Masson-Fontana银技术和Schmorl高铁-铁氰化物还原法；酶方法(如多巴反应)；荧光方法；免疫组织化学。

• 切片脱蜡应尽量干净。
  
• 整个操作过程中尽量使用蒸馏水或去离子水，避免水中还原性杂质影响染色。
  
• Schmorl stain应现用现配，一般2小时内有效。
  
• 1%乙酸水溶液为备选方法，可选做，乙酸浸洗可有助于去除铁氰化物残留。
  
• 冰冻切片和细胞染色，最好根据具体情况摸索实验条件。
  
• 本法可显示任何能还原高铁化物的物质，因此对脂褐素的显示不是特异性的；可根据组织和细胞的不同，色素的位置和分布情况以及着色深浅，对鉴别脂褐素有一定帮助；可与氨银法、醛品红法、高碘酸无色品红法等进行比较观察。
  
• 一般组织都有一定的还原性，易使背景着色，因此染色时应控制在短而恰当的时间内，达到脂褐素清晰而背景浅淡为佳。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 石蜡切片染色
  
  • 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
    
  • 切片厚度4μm，常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水，蒸馏水水洗1min。
    
  • 切片入Schmorl stain浸染1～5min，自来水冲洗2min。
    
    • 切片在Schmorl Stain中的染色时间不宜太长，一般情况下黑色素比脂褐素先着色，2min内应有反应；如染色时间太长，背景将着染很深影响对比观察。
  • (可选)入1%乙酸水溶液中浸洗1～3min，充分去除铁氰化物残留，自来水冲洗2min。
    
  • 入核复染液染色3～10min，自来水冲洗1～2min。
    
  • 常规脱水，二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固
• 冰冻切片染色
  
  • 无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min。
    
  • 染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。
• 细胞染色
  
  • 4%多聚甲醛固定10～20min。
    
  • 自来水冲洗2次，每次2min。
    
  • 蒸馏水冲洗2次，每次2min。
    
  • 染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，但操作时间应相应延长。