产品货号:
GL0618
中文名称:
糖原PAS快速染色液
英文名称:
产品规格:
3×100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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糖原PAS快速染色液采用特别的配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需40min左右,与常规糖原PAS染色液相比,少了苏木素染细胞核的步骤,大大提高了工作效率,适用于石蜡切片和冰冻切片。
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色;由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
组分 | 规格 | 保存 |
过碘酸溶液 | 100mL | 4℃避光 |
Schiff Reagent | 100mL | 4℃避光 |
亚硫酸溶液 | 100mL | RT |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
蒸馏水、系列乙醇、二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液、中性树胶
- 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
- 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃最佳。
- 过碘酸溶液和Schiff Reagent应置于4℃密闭保存,提前恢复到室温,避光暗处使用。
- 在过碘酸溶液和Schiff Reagent中的作用时间非常重要,应该依据切片厚薄、组织的类别等决定,冷冻切片染色时间尽量要短。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 组织固定:石蜡切片固定于Carnoy固定液较好,可在4℃下固定以为避免极化;小块组织2~3h,大块组织可以适当延长时间,但不宜超过18h;固定后的组织可直接用95%乙醇浸洗几次,然后入无水酒精脱水,再透明包埋。
- 石蜡切片二甲苯或脱蜡透明液脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
- 自来水冲洗2~3min,蒸馏水浸洗2次。
- 入过碘酸溶液,室温氧化2~5min,一般不宜超过8min。
- 自来水冲洗1次,蒸馏水浸洗2次。
- 入Schiff Reagent,置于室温阴暗处浸染10~20min(冰冻切片10~15min,石蜡切片可适当延长时间)。
- 在上述操作过程中按亚硫酸溶液∶蒸馏水=1∶2的比例配制亚硫酸工作液;入亚硫酸工作液洗3次,每次2min。
- 自来水冲洗5~10min,更换蒸馏水冲洗。
- 逐级常规乙醇脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
- 颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
PAS反应阳性物质(糖原或多糖) | 红色或紫红色 |
细胞核 | 蓝色 |
细胞质、肌纤维、胶原纤维等 | 深浅不一的红色 |
- 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100mL,处理30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
- (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
- (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。
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