本产品是一种中性、非灭活的病毒保存液,适用于活病毒保存。可用于血浆、血清、无细胞体液、拭子及细胞培养上清等样品采集后的保存和运输,并且无须抽提RNA,可直接用于qRT-PCR,大大简化RNA病毒的核酸检测步骤。
本保存液也称为病毒转运液(Viral Transport Medium,VTM),含有抗生素和FBS。其中抗生素具有广谱抗菌作用,防止加入样品后其它微生物的生长,FBS做为蛋白质稳定剂,对病毒有一定的保护作用,可维持病毒的活性。使用本保存液保存后的病毒未被灭活,可用于后续病毒的培养和分离。
除了常规的非灭活病毒保存液或病毒转运液功能外,在使用合适的一步法qRT-PCR试剂盒情况下,本产品保存的病毒样品也可以直接用做qRT-PCR的模板,大大简化RNA病毒的核酸检测步骤。本产品用于新型冠状病毒(2019-nCoV,SARS-CoV-2) N基因慢病毒(新冠假病毒)样品的保存效果如下表所示。一定量新冠假病毒加入咽拭子中并保存在本保存液中,4℃保存72小时,然后直接进行qRT-PCR,与病毒样品置于-80℃保存(对照组)的Ct值相比,Ct值基本一致。qRT-PCR试剂盒为百奥莱博的新型冠状病毒双荧光qRT-PCR试剂盒(YTB4046),此处的病毒数为每个PCR反应体系中病毒的IU (Infection Unit)数。实验检测结果会因试剂盒、实验条件、检测仪器的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本保存液(4℃/72小时) | 阳性对照组(-80℃保存) | 阴性对照组 | ||||||
病毒数(IU/PCR) | 400 | 40 | 4 | 400 | 40 | 4 | 无菌水 | |
Ct值 | 复孔1 | 24.95 | 29.26 | 32.31 | 24.71 | 28.55 | 31.88 | Undetermined |
复孔2 | 24.88 | 29.50 | 32.16 | 24.94 | 29.02 | 31.89 | Undetermined | |
复孔3 | 24.89 | 29.36 | 32.25 | 24.89 | 28.89 | 31.89 | Undetermined | |
平均值 | 24.91 | 29.37 | 32.24 | 24.84 | 28.82 | 31.89 | - |
本产品保存的病毒样品也可以用于常规的RNA抽提方法进行RNA抽提,如Trizol法和离心柱法等。特别适用于百奥莱博的RNasy病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式,货号:YTB4090)。使用时直接取100μL液体样品,作为RNA提取的对象即可。
使用本保存液采集后的标本应尽快送检,采集后应尽可能在2~8℃、72小时内完成转运。如需更长时间的保存,可以放置于-80℃冰箱保存或使用百奥莱博的RNAstable病毒RNA稳定保存液(YTB4038)保存样品。
组分 | 100mL | 500mL |
BalbDirect RNA病毒直接扩增保存液 | 100mL | 500mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:4℃,有效期一年。
本产品100mL包装可以用于约100~200个样品的保存,500mL包装可以用于约500~1000个样品的保存。
- 标本采集人员需要按照相关要求做好防护,后续操作应在经认证的II级生物安全柜中进行,遵循二级生物安全等级或更高标准。
- 如果保存的病毒样品不经RNA提取而直接用于qRT-PCR,建议选择百奥莱博的ByFast SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit (YTB4068)、ByFast Probe One-Step qRT-PCR Kit (YTB3005)或经过验证的其它试剂盒。由于病毒样品的多样性和不确定性,建议通过与提取法进行预实验比较后再确认是否可以用于直接qRT-PCR。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
病毒样本采集后,将病毒样品直接加入含有0.5~1mL BalbDirect RNA病毒直接扩增保存液的采样管中进行保存,然后置于相应温度条件下保存备用。
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