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本制品是一种能按照1:1的比例、高亲和力、非共价键结合并抑制RNase A、RNase B、RNase C及其它多种类型核糖核酸酶的活性，从而保护RNA不被降解的核糖核酸酶抑制剂。与人源RNase Inhibitor相比，鼠源RNase Inhibitor由于不含感知氧化环境的一对半胱氨酸而具有更高的抗氧化能力，在低浓度DTT (小于1mM)环境下更稳定，是用于Real-time RT-PCR等高浓度DTT敏感的反应中保护RNA不被降解的理想选择。

鼠源RNase抑制剂对RNase A、RNase B、RNase C的活力具有极强且极快速的抑制效果，但并不能抑制RNase 1、RNase T1、S1 Nuclease、RNase H或Aspergillus属RNase的活性。

鼠源RNase抑制剂不会影响AMV/M-MuLV Reverse Transcriptase、Taq DNA Polymerase、SP6/T7/T3 RNA Polymerase的活性，可在保护RNA的同时保证酶促反应的正常进行，广泛适用于RT-PCR、cDNA合成、体外转录、酶促RNA标记等大多数分子生物学反应。

本制品N端带有His标签，反应完成后如有必要，溶液中的鼠源RNase抑制剂可以通过相应的镍柱或His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠吸附去除。镍柱推荐选购His标签蛋白纯化树脂(耐还原螯合型)或His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型)以及His标签蛋白纯化树脂(变性剂耐受型)或His标签蛋白纯化试剂盒(变性剂耐受型)。His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠推荐选购IDA-Ni磁珠、NTA-Ni磁珠、TED-Ni磁珠。

用于cDNA合成、RT-PCR、体外转录、体外翻译、酶促RNA标记反应、以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解；还可用于特定RNase活性的鉴定等。

组分	2kU	10kU	50kU	200kU
鼠源RNase抑制剂(40U/μL)	50μL	250μL	1.25mL	1.25mL×5
说明书	1份

保存：-20℃，有效期1年。


20mM HEPES-KOH，50mM KCl，5mM DTT，50% (v/v) Glycerol，pH7.6@25℃。


纯化自携带编码小鼠RNase Inhibitor基因的E.coli重组菌株。


一个活性单位是指抑制5ng RNase A的50%活性所需的RNase Inhibitor的量。

• 其活性通过检测核糖核酸酶A对胞苷2',3'-环磷酸单酯水解作用的抑制程度来测定。

不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。

• 65℃孵育10分钟可使鼠源RNase抑制剂失活；
  
• SDS和尿素等会导致蛋白变性的试剂以及对氯汞基苯甲酸盐、重铬酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNase的结合。

• 鼠源RNase抑制剂在50℃及以上会使其失活。为防止已与RNase形成复合物的鼠源RNase抑制剂变性失活导致活性RNase的释放，应避免反应温度超过50℃或选择可以耐受更高温度的RNase抑制剂(货号：YT530/YTB4648)。
  
• 每个反应中，推荐鼠源RNase抑制剂的使用浓度为1U/μL，实际使用量可以根据样品中RNase的含量适当调整。
  
• 设置反应体系时，推荐将鼠源RNase抑制剂优先于其它可能存在RNase污染的组分添加，以免造成RNA的降解。
  
• 鼠源RNase抑制剂抑制RNase活性的适用pH值范围较广，pH5～9之间均对RNase活性有良好的抑制效果，尤其在pH7～8范围内对RNase的抑制效果更好。
  
• 加入鼠源RNase抑制剂后，反应体系请避免剧烈振荡、涡旋或引入许多气泡，以免影响对RNase的抑制效果。
  
• 鼠源RNase抑制剂可显著抑制RNase A、RNase B、RNase C的活力，但对RNase 1、RNase T1、S1 Nuclease、RNase H或Aspergillus属RNase的活性没有抑制效果。
  
• 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

• 首次打开管盖前，建议8000～12000×g离心数秒，使附着在管盖或管壁上的液体聚集于管底；并根据使用量与使用次数将本制品进行适当分装并在-20℃保存，以避免反复取用影响抑制活性。
  
• 鼠源RNase抑制剂可广泛兼容cDNA合成、体外转录、体外翻译等大多数常见的分子生物学反应体系，为保护体系中RNA不被降解，可参考如下步骤进行RNase的活性抑制反应：
  
  • 请在冰浴上进行反应体系的配制。
    
  • 推荐在反应体系中加入终浓度为1U/μL的鼠源RNase抑制剂。配制反应体系时，建议优先加入鼠源RNase抑制剂，以充分抑制其他组分中可能含有的RNase的活性。
    
    • 鼠源RNase抑制剂适用的pH值范围较广，在pH5～9之间均有活性，pH7～8之间活力较高。
  • 配制好反应体系后，适当轻轻混匀反应体系，随后低速离心以使粘附在管壁上的液体沉淀至管底。
    
  • 反应条件：适当温度进行反应。
    
    • 鼠源RNase抑制剂在50℃及以上会使其失活。
  • 终止反应(选做)：65℃孵育10分钟可使鼠源RNase抑制剂失活。
• 其它用途请自行根据实验目的，查阅相关文献资料进行。

• 鼠源RNase抑制剂用于抑制RNase A的活性以保护yeast RNA不被降解的效果请参考图1。
  
  图1.鼠源RNase抑制剂用于抑制RNase A的活性以保护yeast RNA不被降解的效果图。5μg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1、0.5、0.25或0U RNase Inhibitor，在100μL的反应体系(50mM MOPS,5mM MgCl₂,pH6.5)中，37℃孵育15分钟。反应完毕后立即取20μL反应产物用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本品与竞品公司的产品相比，具有类似或更优的抑制RNase活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中效果仅供参考。
  
• 鼠源RNase抑制剂用于抑制RNase A的活性以保护HeLa细胞总RNA不被降解的效果请参考图2。
  
  图2.鼠源RNase抑制剂用于抑制RNase A的活性以保护HeLa细胞总RNA不被降解的效果。2μg HeLa细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor，在20μL的反应体系(50mM MOPS,5mM MgCl₂,pH6.5)中，37℃孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本品与竞品公司的产品相比，具有类似或更优的抑制RNase活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。

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