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糖苷内切酶Hf图片
产品货号:
SV1503
中文名称:
糖苷内切酶Hf
英文名称:
Endoglycosidase H and MBP Fusion Protein
产品规格:
100kU|500kU
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
糖苷内切酶Hf(Endo Hf)是糖苷内切酶H(Endo H)与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白,易于去除,具有与糖苷内切酶H(Endo H)相同的活性,用以去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。


糖苷内切酶Hf
Endo H和Endo Hf仅切割高甘露糖型结构(high mannose structures)(n = 2-150,x =(Man)1-2,y = H)和杂合型结构(hybrid structures)(n = 2,x和/或y = AcNeu-Gal-GlcNAc)。


糖苷内切酶Hf克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)并在E.coli中高度表达。


1个活性单位指10μL的反应体系中,37℃条件下,1小时内从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。


组分100kU500kU
Endo Hf(1kU/μL)100μL500μL
10×GlycoBuffer 31mL1mL
10×糖蛋白变性缓冲液1mL1mL

保存:-20℃,有效期一年。


20mM Tris-HCl,50mM NaCl,5mM EDTA,pH7.5@25℃。


1×GlycoBuffer 3:50mM乙酸钠,pH6.0@25℃。
1×糖蛋白变性缓冲液:0.5% SDS,40mM DTT。


1×GlycoBuffer 3,37℃温育。


75℃加热10分钟。


纯度大于≥95%(SDS-PAGE、intact ESI-MS),无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。


  • Endo Hf表观分子量为70kDa
  • 糖苷内切酶Hf活性不受SDS影响。
  • 要使天然糖蛋白去糖基化,可能需要增加酶量并延长温育时间。



一、变性方法
  • 按下表加入各成分并混匀。
    成分用量
    底物糖蛋白1~20μg
    10×糖蛋白变性缓冲液1μL
    ddH2O至10μL

  • 100℃加热10分钟,使糖蛋白变性。
  • 向上述反应管中按下表继续加入相应成分并混匀。
    成分用量
    10×GlycoBuffer 32μL
    Endo Hf1~5μL
    ddH2O至20μL

  • 37℃反应1小时。


二、不变性方法
建议同时进行“一、变性方法”操作,作为去糖基化的程度对照。
  • 按下表加入各成分并混匀。
    成分用量
    底物糖蛋白20μg
    10×GlycoBuffer 32μL
    ddH2O至20μL

  • 加入2~5μL Endo Hf,轻柔混匀,37℃反应4~24小时。

相关搜索:糖苷内切酶Hf糖蛋白去糖基化酶Endo HEndo HfEndoglycosidase H and MBP Fusion Protein
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