产品货号:
SV1503
中文名称:
糖苷内切酶Hf
英文名称:
Endoglycosidase H and MBP Fusion Protein
产品规格:
100kU|500kU
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
糖苷内切酶Hf(Endo Hf)是糖苷内切酶H(Endo H)与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白,易于去除,具有与糖苷内切酶H(Endo H)相同的活性,用以去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。


Endo H和Endo Hf仅切割高甘露糖型结构(high mannose structures)(n = 2-150,x =(Man)1-2,y = H)和杂合型结构(hybrid structures)(n = 2,x和/或y = AcNeu-Gal-GlcNAc)。

糖苷内切酶Hf克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)并在E.coli中高度表达。

1个活性单位指10μL的反应体系中,37℃条件下,1小时内从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

保存:-20℃,有效期一年。

20mM Tris-HCl,50mM NaCl,5mM EDTA,pH7.5@25℃。

1×GlycoBuffer 3:50mM乙酸钠,pH6.0@25℃。
1×糖蛋白变性缓冲液:0.5% SDS,40mM DTT。

1×GlycoBuffer 3,37℃温育。

75℃加热10分钟。

纯度大于≥95%(SDS-PAGE、intact ESI-MS),无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。


一、变性方法
二、不变性方法
建议同时进行“一、变性方法”操作,作为去糖基化的程度对照。
相关搜索:糖苷内切酶Hf,糖蛋白去糖基化酶,Endo H,Endo Hf,Endoglycosidase H and MBP Fusion Protein


Endo H和Endo Hf仅切割高甘露糖型结构(high mannose structures)(n = 2-150,x =(Man)1-2,y = H)和杂合型结构(hybrid structures)(n = 2,x和/或y = AcNeu-Gal-GlcNAc)。

糖苷内切酶Hf克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)并在E.coli中高度表达。

1个活性单位指10μL的反应体系中,37℃条件下,1小时内从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

组分 | 100kU | 500kU |
Endo Hf(1kU/μL) | 100μL | 500μL |
10×GlycoBuffer 3 | 1mL | 1mL |
10×糖蛋白变性缓冲液 | 1mL | 1mL |
保存:-20℃,有效期一年。

20mM Tris-HCl,50mM NaCl,5mM EDTA,pH7.5@25℃。

1×GlycoBuffer 3:50mM乙酸钠,pH6.0@25℃。
1×糖蛋白变性缓冲液:0.5% SDS,40mM DTT。

1×GlycoBuffer 3,37℃温育。

75℃加热10分钟。

纯度大于≥95%(SDS-PAGE、intact ESI-MS),无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。

- Endo Hf表观分子量为70kDa
- 糖苷内切酶Hf活性不受SDS影响。
- 要使天然糖蛋白去糖基化,可能需要增加酶量并延长温育时间。

一、变性方法
- 按下表加入各成分并混匀。
成分 用量 底物糖蛋白 1~20μg 10×糖蛋白变性缓冲液 1μL ddH2O 至10μL - 100℃加热10分钟,使糖蛋白变性。
- 向上述反应管中按下表继续加入相应成分并混匀。
成分 用量 10×GlycoBuffer 3 2μL Endo Hf 1~5μL ddH2O 至20μL - 37℃反应1小时。
二、不变性方法
建议同时进行“一、变性方法”操作,作为去糖基化的程度对照。
- 按下表加入各成分并混匀。
成分 用量 底物糖蛋白 20μg 10×GlycoBuffer 3 2μL ddH2O 至20μL - 加入2~5μL Endo Hf,轻柔混匀,37℃反应4~24小时。
相关搜索:糖苷内切酶Hf,糖蛋白去糖基化酶,Endo H,Endo Hf,Endoglycosidase H and MBP Fusion Protein