产品货号:
RFT258
中文名称:
核酸助沉剂
英文名称:
BalbCarrier Nucleic Acid Precipitation Solution
产品规格:
2ml
发货周期:
1~3天
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BalbCarrier核酸助沉剂是帮助核酸在乙醇中沉淀的一种非动物源性的核酸沉淀专用试剂。乙醇低温沉淀是回收液体样品中DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀并不能完全回收样品中的核酸,特别是在回收微量(<5ng/μl)或者低片段(<200bp)核酸时,损失更为严重(有数据表明,单独的乙醇沉淀只能回收50%的此类DNA和RNA)。
BalbCarrier核酸助沉剂是一种分子生物学级的非动物源性的多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入4~6μL BalbCarrier核酸助沉剂即可明显提高核酸沉淀的得率,可使痕量DNA(<5ng/μl)的回收率达到95~98%,同时可选择性去除短引物(<20bp)片段和dNTP。与生物源性的核酸沉淀助剂如糖原(有文献报道,糖原影响DNA-蛋白质的相互作用)和tRNA相比(tRNA会影响多聚核苷酸激酶对DNA的磷酸化),BalbCarrier核酸助沉剂本身无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等。BalbCarrier核酸助沉剂已成为最常用的核酸助沉剂。
组分 | 规格 |
BalbCarrier核酸助沉剂 | 2×1mL |
3M NaAc,pH5.2 | 5mL |
保存:4℃,有效期2年。
- 按照下表,在1.5mL离心管中依次加入DNA样品,0.1倍样品体积3MNaAc pH5.2,5μL BalbCarrier,2.5倍样品体积无水乙醇,混合均匀;当样品体积大于400μL时,可按每100μL加入1μL BalbCarrier的比例增加使用量,如700μL样品,加8μL BalbCarrier。
成分 不同体积的DNA样品处理 DNA样品 100μL 200μL 300μL 400μL 3M NaAC,pH5.2 10μL 20μL 30μL 40μL BalbCarrier 5μL 5μL 5μL 5μL 无水乙醇 250μL 500μL 750μL 1000μL
注:- 待回收的核酸样品浓度要在10pg/μl至100ng/μl之间。过高浓度的样品使用本产品会降低回收效率,高于300ng/μl的样品不要使用本产品,可以直接使用经典的乙醇沉淀方法回收。
- 加入BalbCarrier核酸助沉剂后无需低温孵育,低温孵育反而会降低回收效率。混匀后请直接进行离心步骤。
- 待回收的核酸样品浓度要在10pg/μl至100ng/μl之间。过高浓度的样品使用本产品会降低回收效率,高于300ng/μl的样品不要使用本产品,可以直接使用经典的乙醇沉淀方法回收。
- 12000rpm常温离心10分钟。
- 弃上清,加入1mL 70%乙醇漂洗沉淀;12000rpm常温离心5分钟。
- 弃上清,快甩离心,用10μL微量移液器彻底吸弃残余乙醇,常温开盖干燥1~2分钟干燥沉淀。
注:干燥时间不要过久,过分干燥的核酸样品不易溶解;干燥时间也不能过短,残余的乙醇会影响核酸样品的后续操作,如抑制内切酶的活性。 - 沉淀溶解于1×TE或超纯水中,-20℃保存。
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