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本制品为氯仿的无毒替代品。该溶液可以在RNA提取等实验中代替氯仿。

• 氯仿是2B类致癌物，长期接触会对健康造成影响，而本制品是一种无毒的代替物。
  
• 本制品分离效果好。
  
• 绿色环保不会造成污染。
  
• 不是管制品，符合国家相关规定。
  
• 本制品只能用于科研。

• 对贴壁细胞（10平方厘米）：吸尽培养液，加入1mL的TRIzol用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移至干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。
  
• 对悬浮细胞（五百万至一千万个）：离心收集细胞，吸尽液体，加入1mL TRIzol，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。
  
• 对新鲜组织（50～100mg）：将新鲜组织剪切成小块，放入10mL或15mL塑料离心管中，加入1mL的TRIzol，用Polytron剪切式匀浆器冰上匀浆30秒左右，将匀浆液转移至新的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。
  
  对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织（细胞中含大量正在复制的DNA），使用量不要超过30～50mg，否则十分容易产生DNA污染。对10mg以下的组织，最好加入本公司的微量RNA助沉剂。
  
  
• 对非冻型RNA保存液保存的组织（50～100mg）：先用纸吸去RNA保存液后再剪切成小块，其余操作同第3步。RNA保存液处理后的组织韧性很强，匀浆时间需要适当延长。
  
• 对液氮中保存的组织（50～100mg）：在研钵中研磨成粉，加入1mL TRIzol，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。
  
• 在装有裂解物/匀浆物的1.5mL塑料离心管中加入0.2mL氯仿替代品，振荡器上充分振荡混均30秒。
  
  一定要把官底的溶液震荡起来，否则只是液面的振动。
  
  
• 13000～15000×g室温离心3分钟。
  
• 将上清液（约0.6mL）转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
  
  • 下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。
    
  • 为保险起见，可以留下50～100μL上清液不取。
• 对脂类丰富的组织（如脂肪组织和脑组织），需再重复氯仿替代品抽提一到两次以让氯仿替代品充分去除脂类分子。
  
• 在上清液中加入等体积的异丙醇，振荡器上振荡30秒混匀。
  
• 13000～15000×g室温离心5分钟，离心底的侧面将形成RNA沉淀。
  
  如果组织使用量低于10mg或需要提高RNA回收率，可以将离心时间延长到20或30分钟。
  
  
• 小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
  
• 在含RNA沉淀的离心管中加入1mL 75%乙醇，振荡混匀30秒。
  
• 13000～15000×g室温离心1分钟。
  
• 小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
  
• 重复第13-15的洗涤步骤一次（也可以省略）。
  
• 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇（约50μL）。注意不要吸弃RNA沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的后续使用。
  
• 室温放1～2分钟后立即加入50～100μL RNase-free水使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以立即使用或存放于-80℃待用。