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钙黄绿素可用作LAMP可见光染料，其原理是在有Mn离子存在的LAMP扩增体系，如果没有LAMP核酸扩增发生，Mn离子和钙黄绿素结合，在紫外照射时不发荧光。如果有LAMP核酸扩增发生，则DNA合成时将产生大量焦磷酸，这些焦磷酸将优先跟Mn2+结合，钙黄绿素则跟体系中多余的Mg²⁺结合，在紫外照射时将发荧光。标准LAMP反应中的镁离子浓度通常在4～10mM之间（跟引物浓度，dNTP浓度相关）。

• 即开即用，含有Mn离子，可以直接加入到含Mn的LAMP扩增体系中。
  
• 其最佳用量根据LAMP体系不同需要用户自己优化，但一般需要终浓度为0.5mM的Mn离子，Mg离子终浓度跟标准LAMP反应的Mg离子浓度一样。

• 将本制品放置在室温融化30分钟，震荡10秒钟，短暂离心后放冰上待用。
  
• 按下表设置20μL体系的LAMP反应：
  

  成分	样品管	阴性对照
  4×LAMP Mix	5μL	5μL
  自备FIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
  自备BIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
  自备F3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
  自备B3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
  自备Loop F引物终浓度（可选项）	0.4μM	0.4μM
  自备Loop B引物终浓度（可选项）	0.4μM	0.4μM
  自备模板DNA	1～100ng	不加
  Bst DNA聚合酶(8U/μL)	1.5μL	1.5μL
  MnCl2溶液(5mM)	2μL	2μL
  钙黄绿素溶液(LAMP显色)	1μL	1μL
  ddH2O	至20μL	至20μL

  
  
• 65℃保温1小时。
  
• LAMP扩增后在紫外灯下检测，有核酸扩增的将发荧光，管中液体颜色为黄绿色。没有扩增的将不发荧光，管中液体颜色为橘黄色。典型的实验结果如下：
  
  图2.左边的有扩增，黄绿色。右边的没有扩增，溶液颜色为橘黄色。
  
• 也可以电泳检测实验结果：取5～10μL扩增产物和自备的上样液混合，上样，进行2～3%的琼脂糖凝胶电泳，有LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性电泳图谱。
  • 强烈不推荐此法，因为电泳时产生的气溶胶非常容易污染环境，使得今后用同一引物扩增时产生假阳性。