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分离纯化环状DNA（质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA）的时候经常需要去除其中的线状DNA污染，而保留共价闭合环状DNA。本公产品就是为满足此需求而开发。

• 即开即用，不需用户花费大量时间去摸索各种条件。
  
• 酶法去除线性DNA，专一性强，可以使线状DNA污染降级几个数量级，不会干扰后续试验。
  
• 不降解双链环状的质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA。
  
• 处理不依赖于DNA序列，可降解任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。
  
• 得到的环状DNA可用于多种后续试验，尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。

• 在干净PCR管中，按下表加入各成分（50μL体系）：
  

  成份	样品	阳性对照	阴性对照
  DNA（1～2μg）	自备样品DNA	自备环状DNA	自备线状DNA
  线性DNA去除溶液A	5μL
  线性DNA去除溶液B	1μL
  自备超纯水	至50μL

  
  
• 根据反应数量，按照反应体系配制含有水、10μM上游引物、10μM下游引物的Mix，根据实验需要决定是否加入10μM的探针，混合均匀后加入装有RT-RPA冻干颗粒的检测单元管中。
  
• 向检测单元管中加入待测RNA样本。
  
• 再向检测单元管盖上加入1.25μL的280mM醋酸镁溶液，盖上管盖，上下颠倒轻甩充分混匀5～6次，低速离心10sec；
  
  本步骤“是否充分混匀”将决定实验结果的重复性。
  
  
• 反应程序设置为：42℃ 30秒，共40循环。
  
• 扩增结束后，扩增产物需再次经历核酸提取或纯化。
  
• 琼脂糖凝胶电泳检测RT-RPA扩增结果。
  
• 若加入探针，则可观察扩增曲线。